化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>細(xì)胞生物學(xué)試劑>細(xì)胞系>BY-0629 293E穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞系
BY-0629 293E穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞系
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- 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0629
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/3 11:59:29
- 訪問(wèn)次數(shù) 261
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293E穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞系
293E穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞系是在經(jīng)典 293 細(xì)胞（人胚腎細(xì)胞系）基礎(chǔ)上，通過(guò)基因工程技術(shù)轉(zhuǎn)入 EB 病毒核抗原 1（EBNA1）基因構(gòu)建而成。這一改造賦予細(xì)胞du特的生物學(xué)特性，使其在基因表達(dá)調(diào)控、蛋白生產(chǎn)及病毒載體構(gòu)建等生物醫(yī)學(xué)研究與應(yīng)用中占據(jù)重要地位。
在生物學(xué)特性方面，293E 細(xì)胞保留了人胚腎細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的特性，顯微鏡下呈多邊形或梭形，細(xì)胞間連接緊密，形態(tài)均一且生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)呈現(xiàn)典型的鋪路石狀排列。細(xì)胞核大而圓，位于細(xì)胞中央，核質(zhì)比適中，染色質(zhì)分布均勻，核仁清晰可見(jiàn)；細(xì)胞質(zhì)豐富，含有發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器，為蛋白質(zhì)合成、加工與分泌提供良好基礎(chǔ)。因穩(wěn)定表達(dá) EBNA1，293E 細(xì)胞能夠高效維持帶有 EB 病毒復(fù)制原點(diǎn)（oriP）的質(zhì)粒，實(shí)現(xiàn)外源基因的穩(wěn)定、高水平表達(dá)，這是其區(qū)別于普通 293 細(xì)胞的關(guān)鍵特性。與普通 293 細(xì)胞相比，293E 細(xì)胞在轉(zhuǎn)染含有 oriP 的質(zhì)粒后，質(zhì)?？呻S細(xì)胞分裂穩(wěn)定遺傳，外源基因表達(dá)周期顯著延長(zhǎng)，表達(dá)效率大幅提升。代謝上，293E 細(xì)胞葡萄糖攝取和糖酵解速率適中，能量供應(yīng)主要依賴(lài)線粒體的有氧呼吸，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)氨基酸、脂質(zhì)代謝途徑也協(xié)同維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與蛋白合成需求。
從分子機(jī)制來(lái)看，EBNA1 蛋白發(fā)揮著核心作用。EBNA1 可特異性結(jié)合 oriP 序列，通過(guò)與宿主細(xì)胞復(fù)制機(jī)器相互作用，使攜帶 oriP 的質(zhì)粒在細(xì)胞周期 S 期進(jìn)行復(fù)制，并在細(xì)胞分裂時(shí)保證質(zhì)粒均分到子代細(xì)胞中。這種作用避免了外源基因整合到細(xì)胞基因組中帶來(lái)的隨機(jī)突變風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)維持了基因表達(dá)的穩(wěn)定性。此外，EBNA1 還可通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)某些轉(zhuǎn)錄因子的活性，間接影響細(xì)胞代謝和蛋白合成相關(guān)基因的表達(dá)，優(yōu)化細(xì)胞內(nèi)環(huán)境，為外源蛋白表達(dá)創(chuàng)造有利條件。在信號(hào)通路層面，PI3K/AKT 信號(hào)通路在 293E 細(xì)胞中處于適度激活狀態(tài)，為細(xì)胞生長(zhǎng)和蛋白合成提供能量和物質(zhì)基礎(chǔ)；MAPK/ERK 信號(hào)通路參與調(diào)控細(xì)胞增殖和基因轉(zhuǎn)錄，二者協(xié)同維持細(xì)胞的正常生理功能和高效的外源基因表達(dá)能力 。
在科研與應(yīng)用領(lǐng)域，293E 細(xì)胞系成果豐碩。在蛋白表達(dá)與生產(chǎn)中，該細(xì)胞系是重組蛋白生產(chǎn)的理想宿主，通過(guò)構(gòu)建帶有 oriP 的表達(dá)載體，可高效表達(dá)各類(lèi)重組蛋白，包括治療性抗體、細(xì)胞因子、酶等。如生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，將抗體基因構(gòu)建至含 oriP 的載體并轉(zhuǎn)染 293E 細(xì)胞，可實(shí)現(xiàn)抗體的穩(wěn)定、大量表達(dá)，且表達(dá)產(chǎn)物具有良好的生物學(xué)活性。在病毒載體構(gòu)建方面，293E 細(xì)胞常用于慢病毒、腺病毒載體的包裝，其穩(wěn)定的外源基因表達(dá)能力確保了病毒載體各組件的足量表達(dá)，有助于獲得高滴度、高感染性的病毒載體，在基因治療和細(xì)胞治療領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在基因功能研究中，科研人員利用 293E 細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)特定基因，通過(guò)調(diào)控基因表達(dá)水平，研究其對(duì)細(xì)胞生理功能、信號(hào)通路的影響，探索基因功能和疾病發(fā)病機(jī)制。在藥物研發(fā)中，293E 細(xì)胞可用于表達(dá)藥物作用靶點(diǎn)蛋白，開(kāi)展藥物篩選和活性評(píng)價(jià)，助力新型藥物的開(kāi)發(fā)。
盡管 293E 細(xì)胞系應(yīng)用廣泛，但也存在局限性。該細(xì)胞系來(lái)源于人胚腎細(xì)胞，在某些生理功能上與體內(nèi)真實(shí)細(xì)胞存在差異，可能影響部分研究結(jié)果的轉(zhuǎn)化；大規(guī)模培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和蛋白表達(dá)效率易受培養(yǎng)條件影響；同時(shí)，EBNA1 的持續(xù)表達(dá)可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響，如改變細(xì)胞代謝和基因表達(dá)譜。未來(lái)，通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)條件、結(jié)合基因編輯技術(shù)進(jìn)一步改造 293E 細(xì)胞系，有望使其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮更大價(jià)值。
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