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2020年12月，歐盟發(fā)布COMMISSION REGULATION (EU) 2020/2040，修訂條例 (EC) No. 1881/2006 關于某些食品中吡咯里西啶類生物堿（Pyrrolizidine Alkaloids，以下簡稱PAs）的最高含量，正式設定PAs在食品中的*。其中對于茶葉和調(diào)味茶中的*為150μg/kg，該*計算21種吡咯里西啶類生物堿的總和。該法規(guī)將于2022年7月1日正式執(zhí)行。

PAs是植物產(chǎn)生的用于抵御食草動物的一類毒素，分布廣泛。大多具有肝毒性和潛在致癌性，可以在蜂蜜、茶和草藥中找到。每種PA的毒性各不相同，對于食品制造商和食品藥品監(jiān)管機構而言，準確識別和量化食品中的PAs至關重要。

迄今為止，已知的PA超過660種，其中許多是異構體。對于異構體PA的鑒定，與LC-MS/MS相比，SFC-MS/MS提供了更加優(yōu)異的色譜選擇性。本文介紹利用SFC-MS/MS分析34種吡咯里西啶類生物堿（包括5種石松胺和2種千里光寧堿異構體）的應用案例，輕松應對歐盟茶葉檢測新規(guī)。

樣品前處理：茶樣品用 0.05 M 硫酸超聲提取兩次，合并提取物并用氫氧化銨調(diào)節(jié)pH值，然后進行固相萃?。ň唧w步驟參見原文），洗脫物氮吹干燥后用1mL甲醇復溶，離心10min后取上清液待測。

色譜及質(zhì)譜條件：參見原文。

  SFC-MS/MS分析34種吡咯里西啶類生物堿的典型色譜圖

  5種石松胺和2種千里光寧堿異構體基線分離色譜圖

利用島津SFC方法開發(fā)系統(tǒng)，分別考察了4種不同的手性色譜柱和8種不同的改性劑組成的色譜條件。得到的最終分析條件，可以對18種PA和16種相關N-氧化物進行定量分析。對紅茶基質(zhì)樣品的分析結果表明從2到200μg/kg 范圍內(nèi)線性良好，部分PA定量下限可達到0.1μg/kg。具體數(shù)據(jù)參見下表。

  紅茶基質(zhì)中34種吡咯里西啶類生物堿的 LLOQ

基于本方法分析了10種市售茶葉樣品，其中4種可以檢出1種或多種吡咯里西啶生物堿。1個茶葉樣品中檢出了歐天芥菜堿、天芥菜堿、毛果天芥菜堿及其相關N-氧化物，3個茶葉樣品中檢出了石松胺、刺凌德草堿及其相關N-氧化物。

  本應用中使用的儀器（Nexera SFC+LCMS-8060）

參考文獻：

1，Determination of pyrrolizidine alkaloids in plant material using SFC-MS/MS, ASMS 2019, TP-221