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本文由中國藥科大學(xué)天然藥物國家重點實驗室藥物代謝與藥代動力學(xué)重點實驗室所作，發(fā)表在Journal of Chromatography B  （2015）46-53。

三七皂苷是中藥三七的主要活性成分，具有抗氧化、抗高血糖、抗肥胖等多種生物活性。然而，由于三七皂苷在體內(nèi)濃度低、成分復(fù)雜，其藥代動力學(xué)評價仍然是一項艱巨的任務(wù)。

本研究建立了一種基于超快速液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UFLC-MS/MS）的大鼠血漿中三七皂苷含量快速、靈敏的定量分析方法。三七皂苷R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1和Re經(jīng)正丁醇液-液萃取，在ODS C18柱(5 mm× 50 mm × 2.1 mm)上分離，采用二元梯度洗脫，以負(fù)離子模式同時監(jiān)測，所有化合物均在9 min內(nèi)進行分析。多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)方法如下:R1 (m/z 967.7→637.4)、Rg3 (m/z 819.6→621.4)、Rd (m/z 819.6→783.5)、Rg2 (m/z 819.6→475.4)、Rb2 (m/z 1113.4→783.4)、Rf (m/z 835.6→475.4)、Rb1 (m/z 1143.7→945.6)、Re (m/z 981.6→637.4)、內(nèi)標(biāo)(地高辛，m/z 815.5→779.4)。驗證參數(shù)(線性、靈敏度、日內(nèi)和日間的精密度和準(zhǔn)確度、回收率和基質(zhì)效應(yīng))均在可接受范圍內(nèi)，生物提取物在整個儲存和制備過程中穩(wěn)定。將UFLC-MS/MS方法應(yīng)用于三七提取物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究，進一步驗證該方法的有效性，并利用Winolin軟件計算了藥代動力學(xué)參數(shù)。

因此，該方法簡便、可靠、準(zhǔn)確、精密，可用于各種三七皂苷和其他中藥皂苷的藥代動力學(xué)研究。

使用儀器：島津LCMS-8050

圖1 三七皂苷R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1、Re和地高辛(內(nèi)標(biāo))的結(jié)構(gòu)

圖2 三七皂苷R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1和Re的線性曲線。

圖3 空白大鼠血漿和添加R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1、Re和IS的大鼠血漿的典型MRM色譜。(A)空白大鼠血漿MRM色譜，(B)添加三七皂苷(50.0 ng/mL)和IS的空白血漿的MRM色譜，(C)大鼠灌胃三七提取物（1.0 g/kg）后2 h大鼠血漿的MRM色譜。

三七是一種在世界范圍內(nèi)廣泛使用的植物藥，有必要建立一種可靠、靈敏、高通量的方法來測定生物樣品中的多種三七皂苷。本文以9種三七皂苷(R1、Rg3、Rd、Rg2、Rb2、Rf、Rg1、Rb1和Re)為研究對象，構(gòu)建了一個功能強大的中藥皂苷藥動學(xué)分析技術(shù)平臺。該方法色譜運行時間較短，LLOQs較低，可快速、靈敏地測定大鼠血漿中三七皂苷的含量。此外，該方法專屬性強、結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，已成功應(yīng)用于大鼠灌胃三七提取物后三七總皂苷的臨床前藥代動力學(xué)研究。更重要的是，目前開發(fā)的方法稍加修改后，即可用于其他草藥皂苷的藥代動力學(xué)研究。

文獻題目

《Development and validation of an UFLC-MS/MS assay for the absolute quantitation of nine notoginsenosides in rat plasma: Application to the pharmacokinetic study of Panax Notoginseng Extract》

使用儀器

島津LCMS-8050

作者

Lijun Zhou a, Rong Xinga,b, Lin Xiea,Tai Raoa, Qian Wanga, Wei Yea, Hanxu Fua,Jingcheng Xiaoa,b,Yuhao Shaoa,b, Dian Kanga,b, Guangji Wanga, Yan Lianga

a. Key Lab of ug Metabolism hamon y booy of Atul Me Pamaeu Univ. Tongaxang24 Nanjing 210009. China

b. Department of Pharmacy. The First ffiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu Anhui. China