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羅丹明 B（Rhodamine B），是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。易溶于水、乙醇， 微溶于丙酮、氯仿、鹽酸和氫氧化鈉溶液。呈紅色至紫羅蘭色粉末，水溶液為藍(lán)紅色，稀釋后有強(qiáng)烈熒光，醇溶液有紅色熒光。也可作為食品染色劑使用，但在 2017 年 10 月世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)公布的致癌物清單中，羅丹明 B 在 3 類致癌物清單中。因此，本文參考《BJS 201905 食品中羅丹明 B 的測定 》，建立了使用譜育科技的超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀測定食品中羅丹明 B 含量的快速且高靈敏度的檢測方法。

實驗部分

儀器：ULC 510 超高效液相色譜儀（具體配有二元超高壓輸液泵、超高壓自動進(jìn)樣器（含冷卻功能）、柱溫箱）、EXPEC 5210 三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀。

標(biāo)準(zhǔn)品：羅丹明 B（純品，液體），購自 A ChemTek, Inc.，于-20℃冰箱保存。試劑：超純水，甲酸為色譜級（CNW），甲醇(色譜級，美國 TEDIA)。

液相和質(zhì)譜條件

監(jiān)測模式為多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)，各化合物監(jiān)測離子對、碰撞電壓(CE)等參數(shù)見下表

線性和檢出限

      用甲醇稀釋得到一系列濃度的羅丹明 B 標(biāo)品(0.5ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/ml、20ng/ml),按照上述方法進(jìn)樣，以各目標(biāo)物的定量離子色譜峰面積（Y）為縱坐標(biāo)， 目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)，權(quán)重系數(shù)為 1/x，采用外法擬合后的標(biāo)準(zhǔn)曲線如下

圖 1 所示。標(biāo)準(zhǔn)曲線低點定量離子色譜圖如圖 2 所示，配置 0.5ng/ml 標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，按照S/N=10 和 S/N=3 計算定量限和檢出限，結(jié)果如下表 1 所示。且本實驗的檢出限全符合《BJS 201905 食品中羅丹明 B 的測定》的要求。

圖 2 羅丹明 B 的定量限的色譜圖（0.5ng/ml） 

重復(fù)性

      分別配置 0.5 ng/mL 和 5ng/mL 不同濃度對照品，分別連續(xù)進(jìn)樣 6 次，考察保留時間和響應(yīng)的重復(fù)性。

      0.5ng/ml 重復(fù)性：保留時間和響應(yīng)的 RSD 值分別是 0.00%和 1.9%。

      5ng/ml 重復(fù)性：保留時間和響應(yīng)的 RSD 值分別在 0.00%和 6.9%之間。

      可知所有化合物的保留時間和峰面積均在 6.9%以下，精密度較好。

結(jié)語

      樣品經(jīng)提取等前處理過程，使用 LC-MS/MS 系統(tǒng)進(jìn)行測定。本文考察了方法的線性、精密度、靈敏度等，結(jié)果表明: 羅丹明 B 在檢測范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)均大于 0.99；方法精密度在 6.9%以內(nèi)，靈敏度符合國家標(biāo)準(zhǔn)要求。使用高靈敏、高抗污染能力的 EXPEC 5210 系統(tǒng)，可以對食品中羅丹明 B 含量進(jìn)行靈敏、準(zhǔn)確的定量檢測。

• 液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀

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