Acclaim Organic Acid—脫氫乙酸峰型拖尾“終結(jié)者"

胡金勝

食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)修訂

2021年3月26日，國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)審評(píng)委員會(huì)秘書(shū)處發(fā)函，對(duì)組織起草的《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》等12項(xiàng)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（征求意見(jiàn)稿）公開(kāi)征求意見(jiàn)。備受關(guān)注的GB 2760時(shí)隔多年再次修訂，變更的內(nèi)容涉及到多個(gè)常用的食品添加劑，其中防腐劑“脫氫乙酸及其鈉鹽" 使用規(guī)定的修改引發(fā)了熱議。

左右滑動(dòng)查看GB 2760中脫氫乙酸

及其鈉鹽修訂細(xì)節(jié)

脫氫乙酸及其鈉鹽作為一種廣譜食品防腐劑，毒性較低，對(duì)霉菌和酵母菌的抑制能力強(qiáng)，按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍和使用量使用是安全可靠的。然而通過(guò)匯總近些年來(lái)全國(guó)各地食品安全監(jiān)督抽檢結(jié)果，我們不難發(fā)現(xiàn)脫氫乙酸及其鈉鹽超*、超范圍使用的情況屢有發(fā)生。由于脫氫乙酸及其鈉鹽能被人體*吸收，并能抑制人體內(nèi)多種氧化酶，長(zhǎng)期過(guò)量攝入脫氫乙酸及其鈉鹽會(huì)危害人體健康。

隨著GB 2760征求意見(jiàn)稿的發(fā)布，針對(duì)食品添加劑脫氫乙酸及其鈉鹽，收窄了使用范圍，降低了最大使用量，釋放了監(jiān)管部門(mén)將進(jìn)一步加強(qiáng)監(jiān)管的信號(hào)。由于政策信息傳遞的延遲及生產(chǎn)工藝革新的滯后，部分食品企業(yè)可能會(huì)面臨因脫氫乙酸及其鈉鹽超*、超范圍使用而被監(jiān)管部門(mén)處罰的風(fēng)險(xiǎn)。

目前，食品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室參照GB 5009.121-2016開(kāi)展脫氫乙酸的測(cè)定也會(huì)遇到一系列的難題，其中最突出的問(wèn)題就是脫氫乙酸峰型拖尾，影響定性和定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。脫氫乙酸屬于非羧基酸類(lèi)，分子結(jié)構(gòu)存在烯醇互變，導(dǎo)致在普通C18 上峰型容易出現(xiàn)拖尾。相關(guān)文獻(xiàn)顯示，通過(guò)調(diào)節(jié)緩沖鹽pH（調(diào)酸或調(diào)堿）和有機(jī)相比例可以在一定程度上抑制脫氫乙酸的拖尾，但是在食品安全監(jiān)督抽查中對(duì)于實(shí)驗(yàn)室方法的偏離及變更有著較為嚴(yán)格的審核流程，這也是實(shí)驗(yàn)室體系管理難以回避的問(wèn)題。

基于此，賽默飛實(shí)驗(yàn)室篩選了一款特色色譜柱—Acclaim Organic Acid，在不變更標(biāo)準(zhǔn)色譜條件的前提下，開(kāi)展了一系列的驗(yàn)證工作，完美解決了脫氫乙酸峰型拖尾的問(wèn)題，并且在實(shí)際樣品分析過(guò)程中有著出色的表現(xiàn)。

Acclaim Organic Acid有機(jī)酸分析專(zhuān)用柱，極性嵌入，專(zhuān)利封端技術(shù)，可耐受 100% 水相，PEEK 柱管，可有效消除硅膠表面殘余硅羥基及金屬柱管內(nèi)壁與有機(jī)酸分子次級(jí)作用導(dǎo)致的拖尾。

實(shí)驗(yàn)譜圖及數(shù)據(jù)

色譜條件

液相色譜儀：Vanquish™ Core HPLC 液相色譜系統(tǒng)

色譜柱：Acclaim Organic Acid, 5 μm, 4.0×250 mm    (P/N: 062902)

柱溫：30 ℃；

進(jìn)樣量：5 µL；

流動(dòng)相：A為20 mM 乙酸銨溶液，B為甲醇

洗脫程序：A:B=90:10，等度洗脫

流速：0.8 mL/min

檢測(cè)波長(zhǎng)：293 nm

采樣頻率：5 Hz

采集時(shí)間：15 min

分離譜圖

脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液5.00 μg/mL，保留時(shí)間為7.107 min，不對(duì)稱(chēng)因子為1.04，理論塔板數(shù)為13830。脫氫乙酸在 Acclaim Organic Acid 色譜柱上獲得了出色的峰型和優(yōu)異的靈敏度。

圖1. 脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液色譜圖（5.00 μg/mL） 

脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)工作液線性范圍為0.50-50.0 μg/mL，線性方程y=0.6283x-0.0141，線性相關(guān)系數(shù)r2=0.99990，線性關(guān)系良好。

圖2. 脫氫乙酸線性方程圖及標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)疊加色譜圖（0.50-50.0 μg/mL）

以脫氫乙酸峰高為 S，選取 4-6 min 基質(zhì)噪音的平均值為 N，采用 Chromeleo 數(shù)據(jù)處理軟件計(jì)算信噪比 S/N，脫氫乙酸線性低點(diǎn) 0.50 μg/mL信噪比S/N為181.8。實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)實(shí)際情況設(shè)置合適的線性最低點(diǎn)，以滿足方法檢出限的要求。

圖3. 脫氫乙酸線性低點(diǎn) 0.50 μg/mL 色譜圖及信噪比

脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液 1.00 μg/mL 重復(fù)進(jìn)樣，保留時(shí)間RSD為0.04%，峰面積RSD為0.28%，不對(duì)稱(chēng)因子RSD為0.34%，重現(xiàn)性良好。

圖4. 脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液 1.00 μg/mL 6次重復(fù)進(jìn)樣疊加譜圖

在實(shí)際樣品分析中，面對(duì)各種復(fù)雜基質(zhì)的干擾，Acclaim Organic Acid 表現(xiàn)出了非常出色性能。以下譜圖分別展示了Acclaim Organic Acid 應(yīng)用于雞蛋掛面、豬肉脯、肉松面包、法式小面包及芒果汁中脫氫乙酸的測(cè)定。樣品前處理方法采用標(biāo)準(zhǔn)推薦的直提法，其中芒果汁樣品基質(zhì)復(fù)雜，對(duì)流動(dòng)相比例和柱溫進(jìn)行了適當(dāng)調(diào)整。

圖5. 雞蛋掛面中脫氫乙酸的測(cè)定

圖6. 豬肉脯中脫氫乙酸的測(cè)定

圖7. 肉松面包中脫氫乙酸的測(cè)定

圖8. 法式小面包中脫氫乙酸的測(cè)定

圖9. 芒果汁中脫氫乙酸的測(cè)定

本試驗(yàn)基于Vanquish™ Core HPLC液相色譜系統(tǒng)，采用Acclaim Organic Acid有機(jī)酸分析專(zhuān)用柱，對(duì)多種食品基質(zhì)中脫氫乙酸的測(cè)定開(kāi)展了驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Acclaim Organic Acid能夠完美解決脫氫乙酸峰型拖尾的問(wèn)題，有效排除各種復(fù)雜樣品基質(zhì)的干擾，為食品實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確定性和定量分析脫氫乙酸，提供了一個(gè)高效便捷的方法。

那么，有請(qǐng)我們的主角閃亮登場(chǎng)……

此處應(yīng)有掌