久久久久亚洲精品男人的天堂,日本韩国男男作爱GAYWWW,特黄AAAAAAA片免费视频,av天堂电影网

您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

13011300176

technology

首頁   >>   技術文章   >>   巨噬細胞的提取和分離方法是什么?

天津益元利康生物科技有限...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

巨噬細胞的提取和分離方法是什么?

閱讀:948      發(fā)布時間:2023-10-9
分享:

巨噬細胞是機體免疫系統(tǒng)的重要細胞成分,具有抗感染、抗腫瘤和參與免疫應答、免疫調節(jié)等生物學功能。腹腔巨噬細胞多游離存在于腹水中易于獲得。因此,可以通過向小鼠腹腔內注射刺激物制造無菌炎癥環(huán)境以積聚巨噬細胞,來進行巨噬細胞研究。那么巨噬細胞的提取和分離方法是什么呢?讓我們一起來看看吧!

一、材料

小鼠,SPF級,體質量1822 g,雄性,68周齡。

二、肉湯制備

1. 6%淀粉肉湯制備

1.0g胰蛋白胨、0.3g牛肉浸膏和0.5g氯化鈉放入盛有100 mL雙蒸水的燒杯中,置于磁力攪拌器常溫溶解后121℃滅菌30min,于4℃保存。

2. 3%巰基乙酸鹽肉湯的制備

1L雙蒸水中加入29g巰基乙酸鹽,煮沸使其wan全溶解,玻璃瓶或離心管分裝后121℃滅菌15min,4℃保存,使用前確保已經(jīng)冷卻。

三、巨噬細胞的誘導

每次腹腔注射3%巰基乙酸鹽肉湯1mL,每天1次,3d后用預冷PBS灌洗腹腔2次。

四、巨噬細胞的收集

準備75%乙醇,以脫頸方式處死小鼠,浸泡3min。取出,置于無菌操作臺,仰臥位固定小鼠,右手持注射器于右下腹部將針頭刺入皮下進入腹腔,將5mL預冷的PBS(培養(yǎng)液組為5mL預冷的10%血清RPMI 1640培養(yǎng)液) 注入腹腔,按摩小鼠腹部5min。無菌條件下剪開小鼠腹部皮膚顯露胸腹部,用無菌止血鉗提起劍突處組織,無菌剪刀在該處剪開約1mm2小口。注意止血鉗保持提起狀態(tài),用無菌巴氏吸管從腹腔開口深入腹腔,反復沖洗腹膜腔灌洗液2次,可回收約8mL 淡黃色灌洗液。

五、巨噬細胞的純化與培養(yǎng)

將每只小鼠的灌洗液于常溫條件下1000r /min 離心10min,所得細胞沉淀用RPMI 1640培養(yǎng)液重懸接種,培養(yǎng)體系于37℃靜置培養(yǎng)23h后洗去未貼壁細胞,余下的貼壁細胞即為巨噬細胞

六、巨噬細胞形態(tài)學觀察及計數(shù)

細胞貼壁培養(yǎng)24h后在倒置顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài)。用0.5%胰酶消化細胞,離心棄上清液,PBS重懸得到細胞懸液,用細胞計數(shù)板計數(shù)每只小鼠腹腔中分離的巨噬細胞數(shù)量。

七、臺盼藍染色檢測巨噬細胞活性

500μL的各組巨噬細胞懸液和500μL臺盼藍染液(0.4%濃度) 加入3.5cm培養(yǎng)皿,搖勻后靜置38min; 吸取1滴混合液滴入載玻片,3min內鏡下計數(shù)巨噬細胞200個,分別統(tǒng)計活/死細胞數(shù)目(死細胞呈藍色,活細胞無色透亮) ; 細胞活性(%) = 活細胞數(shù)/200×100%。每組檢測重復3次。

更多有關巨噬細胞的提取和分離方法,請聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司:



會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
久久精品国产69国产精品亚洲| 日韩国产精品99久久久久久| 亚洲中文字幕日产无码成人片| 亚洲熟妇熟女久久精品综合| 久久久久亚洲AV无码专区首JN| 国产98在线传媒在线视频| 一本一道精品欧美中文字幕| 一边摸一边做爽的视频17国产| 婷婷久久青草热一区二区| japanese色国产在线看视频| 挡不住的风情在线观看| 日本丰满大乳人妻无码苍井空| 在线看片免费不卡人成视频| hh99me福利毛片在线看| 美女把尿口扒开让男人桶| 在线播放周妍希国产精品| 精品久久久久久无码中文野结衣| 欧美日韩av网站| 国产精品186在线观看在线播放| 亚洲av狠狠爱| 无码人妻丰满熟妇区毛片| 欧美日韩精品免费一区二区三区| avtt天堂网Av无码| 人摸人人人澡人人超碰手机版| 999.com男人天堂| 国产亚洲日韩欧洲一区五月天| 性少妇FREESEXVIDEOS高清BBW| 中文字幕日韩精品人妻| 人妻少妇精品无码专区二区| √天堂资源在线中文8在线最新版| 中国大陆女rapper18岁欢迎您免费| 大陆熟妇丰满多毛XXXX| 日日摸夜夜添无码AVA片| 内射一面膜上边一面膜下边| 无码H动漫在线播放| 亚洲 欧美 日韩中字幕| 久久国产高潮流白浆免费观看| 韩国无码AV片午夜福利| 国产曰韩欧美| 午夜电影院理伦片8888| 国产性猛交╳XXX乱大交|