久久久久亚洲精品男人的天堂,日本韩国男男作爱GAYWWW,特黄AAAAAAA片免费视频,av天堂电影网

您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

13011300176

technology

首頁   >>   技術(shù)文章   >>   免疫熒光實驗流程有哪些?

天津益元利康生物科技有限...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)

免疫熒光實驗流程有哪些?

閱讀:815      發(fā)布時間:2023-10-9
分享:

免疫熒光是一種常用的光學(xué)顯微術(shù),即用熒光顯微鏡來觀察細(xì)胞中的特定生物分子。免疫熒光依賴于抗體抗原的特異性結(jié)合,然后通過直接標(biāo)記或間接標(biāo)記方法使用熒光分子指征抗體-抗原結(jié)合的位置,以確定目標(biāo)生物分子在細(xì)胞中的位置、豐度和分布情況。那么你知道免疫熒光實驗流程有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!

1. 固定

固定液種類:有機(jī)溶劑(甲醇、乙醇、丙酮等);交聯(lián)劑(4%PFA、10%中性福爾馬林),固定液的選擇取決于被研究抗原的性質(zhì)及所用抗體的特性。但針對磷酸化的抗體,不適合用甲醛,會導(dǎo)致磷酸蛋白從膜表面轉(zhuǎn)移到胞漿中,故應(yīng)選擇冰冷的無水甲醇或無水乙醇,同時應(yīng)注意甲醛會揮發(fā),在4-8°C不宜儲存太久。

固定時間:取決于組合塊的大小和類型,對于大多數(shù)組織,18-24h較為理想,細(xì)胞固定時間較短,一般2%的甲醛室溫固定20min即可。

2. 透化

通透的目的是使抗體進(jìn)入胞內(nèi)。0.5% Triton X-100 室溫通透20 min(針對胞內(nèi)抗原,若是細(xì)胞膜上表達(dá)的抗原則省略該步驟);除了Triton X-100,丙酮也可作為通透劑,并且丙酮固定后的樣品不需要通透。

3. 封閉

封閉可減少一抗和二抗與非特異性位點結(jié)合。通透后用PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水紙吸干PBS,在玻片上滴加山羊血清,室溫封閉30min。常用的封閉液包括:與二抗同一來源的血清、BSA或者是羊血清。從封閉開始所有的步驟,一定要注意樣品的保濕,避免樣品的干燥,否則極易產(chǎn)生較高的背景。醛類固定的樣品,在用一抗孵育前用含0.3M甘氨酸的封閉液進(jìn)行封閉。

4. 一抗孵育

根據(jù)一抗說明書,按照適當(dāng)比例用一抗稀釋液稀釋一抗,用吸水紙吸盡封閉液,每張玻片滴加稀釋好的一抗并放入濕盒, 4℃孵育過夜。回收一抗,加入PBST, 在搖床上緩慢搖動洗滌5 min,共洗滌3次。

5. 熒光二抗孵育

用吸水紙吸盡洗滌液后滴加稀釋好的熒光二抗,濕盒中孵育1h后,回收二抗,接著用PBST洗3次,每次5 min;由于熒光容易淬滅,故從加熒光二抗起,后面所有操作步驟都要避光。

6. 復(fù)染核(定位的關(guān)鍵)

在玻片上滴加DAPI,并注意避光孵育5min,對標(biāo)本進(jìn)行染核,然后用PBST洗3次,每次5min,洗去多余的DAPI。

7. 封片

用吸水紙吸干爬片上的液體,用含抗熒光淬滅劑的封片液封片,然后在熒光顯微鏡下觀察。

更多有關(guān)免疫熒光實驗流程的內(nèi)容,請聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司:




會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
国产欧美日韩专区发布| 邻家哥哥别上我的床| 色妞WWW精品视频在线观看| 一个在上面吃一个在下吃视频| 五月天婷婷在线亚洲综合一页| 少妇人妻偷人精品一区二区| 欧美日韩黄色网| WWW夜插内射视频网站| 东京热毛片无码DVD一二三区| 亚洲影视久久| 大尺度极品粉嫩嫩模免费| 欧美日韩中黄片| 好男人视频社区www官网| 久久A级毛片免费观看| 久久综合综合久久综合| 人摸人人人澡人人超碰手机版| 91精品福利一区二区| 国产免费一区二区三区免费视频| 成人AAA片一区国产精品| 亚洲乱码一二三四区| 国模无码视频一区二区三区| 久久久久久久久久久久| 欧美三级一区| 免费看男人j放进女人j免费看| 千金去SM体验馆被调教| 欧美日韩亚洲精品瑜伽裤| 日韩精品一区二区牛| 欧美日韩一级高清电影网站片| 国产精品毛片一区二区| 少妇被CAO高潮呻吟声| 好男人日本社区WWW| 星空无限传媒一二三区| 亚洲日韩一区精品射精| 日本精品久久久一区二区三区| 少妇扶着墙屁股撅起来| 99久久免费精品国产观看| 久久精品乱子伦免费| 国产精品1024在线永久免费| 果冻传媒播放观看免费| 中文字幕日韩一区二区三区不卡| 麻花传媒MV一二三区别在哪里看|