日常診斷的課題

例如，在Heppner博士的診斷研究所，被懷疑是各種肌肉疾病時(shí)，為了檢測(cè)淀粉樣物質(zhì)，用LCO（發(fā)光共軛寡聚噻吩）在FFPE切片上做標(biāo)記。淀粉樣物質(zhì)不僅像阿爾茲海默病那樣沉淀在腦中，而且沉淀在肌肉、腦外的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)中。在左右診斷的生物化學(xué)的結(jié)構(gòu)、形態(tài)的判斷上使用了熒光檢測(cè)。在日常診療中，使用熒光顯微鏡的自身免疫性腦疾病患者的免疫球蛋白檢測(cè)也是標(biāo)準(zhǔn)的檢查手法。以前實(shí)施現(xiàn)在所講的檢查時(shí)，必須使用位于別的建筑物的研究設(shè)備，而且需要預(yù)約排隊(duì)使用該設(shè)備。

在日常診斷中引進(jìn)基恩士的熒光顯微成像系統(tǒng)BZ的優(yōu)點(diǎn)是明顯的。將BZ放置在顯微鏡檢查討論室，可以隨時(shí)使用，而且（因?yàn)槿妱?dòng)控制）操作簡(jiǎn)單，所以不需要復(fù)雜而耗時(shí)的培訓(xùn)。不使用支持熒光觀察的掃描器，也能夠當(dāng)即分析患者樣本，擬訂書(shū)面材料。另一大優(yōu)點(diǎn)是醫(yī)生、研究員現(xiàn)在就能在當(dāng)?shù)貙W(xué)習(xí)使用方法，可結(jié)合各自的計(jì)劃進(jìn)行學(xué)習(xí)。

研究與診斷不斷變化的邊界

多重?zé)晒膺^(guò)去主要被用于神經(jīng)-病理學(xué)研究所的研究，但是現(xiàn)在同樣被用于診斷中。不同種類(lèi)細(xì)胞中研究對(duì)象結(jié)構(gòu)的共定位是Heppner博士的研究小組正在進(jìn)行的CoV-19的研究的一部分，該研究提供了SARS-CoV-2如何從嗅粘膜擴(kuò)散到腦的發(fā)現(xiàn)。從以神經(jīng)-病理學(xué)研究所為代表的20多個(gè)參與研究的小組獲得的轉(zhuǎn)化研究結(jié)果2020年11月底被發(fā)表在Nature Neuroscience雜志^[1]上。使用落射熒光顯微鏡在嗅粘膜內(nèi)的神經(jīng)元上檢測(cè)到SARS-CoV-2的刺突蛋白，病毒能夠沿著嗅覺(jué)神經(jīng)抵達(dá)腦干。通過(guò)使用多重?zé)晒馊旧?，發(fā)現(xiàn)了至今為止沒(méi)有在神經(jīng)元內(nèi)檢測(cè)到的病毒。這暗示如果通過(guò)穿過(guò)CNS的細(xì)血管，病毒也能侵入腦內(nèi)。

但是，盡管沒(méi)有在腦內(nèi)檢測(cè)到病毒，在CoV-19的患者中，有人在急性癥狀治愈后，也會(huì)呈現(xiàn)出晚期的病毒感染后神經(jīng)障礙（所謂的Long-COVID）等癥狀。例如，基于在腦內(nèi)引起的免疫細(xì)胞的細(xì)胞因子風(fēng)暴這一觀點(diǎn)分析，此類(lèi)障礙看來(lái)是免疫系統(tǒng)對(duì)SARS-CoV-2的反應(yīng)引起的。雖然Long-COVID的研究才剛剛開(kāi)始，但是CNS的作用在其中占據(jù)重要位置。

研究課題

多發(fā)性硬化癥是慢性的炎癥性自身免疫性神經(jīng)疾病。神經(jīng)-病理學(xué)研究所的Helena Radbruch博士的研究小組正在研究患有該疾病的患者的腦內(nèi)的特定免疫細(xì)胞的生存環(huán)境。研究方法是使用相同部分的連續(xù)切片進(jìn)行多重染色和空間分解的轉(zhuǎn)錄組分析。不論哪一個(gè)都是非常耗費(fèi)時(shí)間和金錢(qián)的分析，但是如果使用熒光顯微成像系統(tǒng)BZ，可以更高效且更加節(jié)省資源。利用高速拍攝和光學(xué)切片，可以預(yù)先簡(jiǎn)單調(diào)查組織樣本是否適合進(jìn)一步分析，膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元、血管、髓膜以及各種各樣的免疫細(xì)胞亞型等，能夠分別驗(yàn)證相對(duì)于各個(gè)腦組織的各抗體。

過(guò)去幾年，Heppner博士為研究阿爾茲海默病構(gòu)建了狀態(tài)清晰的腦檢測(cè)的生物樣本庫(kù)。來(lái)自該數(shù)據(jù)庫(kù)的樣本普遍表現(xiàn)出因腦內(nèi)的變性沉淀物引起的高亮度的自發(fā)熒光。由于阿爾茲海默病的患者多數(shù)是由于年齡誘發(fā)死亡的患者，這個(gè)問(wèn)題對(duì)于研究小組來(lái)說(shuō)是日常性的問(wèn)題。在一生之中，尤其是患有腦的變性疾病的患者，有引起高亮度的自身熒光的眾多物質(zhì)沉淀的可能性。在這種情況下，對(duì)于Heppner博士的團(tuán)隊(duì)來(lái)說(shuō)，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ能夠消除熒光模糊，清晰地映出自噬體、溶酶體等各個(gè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)十分重要。

Heppner博士說(shuō)道，多虧有熒光顯微成像系統(tǒng)BZ，神經(jīng)-病理學(xué)研究所的日常研究、日常工作被大幅簡(jiǎn)化。全電動(dòng)控制的顯微鏡能夠快速生成熒光圖像，此外在發(fā)生問(wèn)題時(shí)，也可通過(guò)基恩士的客服的遠(yuǎn)程操作快速解決。在會(huì)議中展示熒光圖像時(shí)，也不必調(diào)暗房間內(nèi)的燈光。由于BZ可以拍攝符合研究需求的高精細(xì)圖像，僅限例外的情形才需要激光共聚焦顯微鏡。圖像拼接功能在患者樣本、阿爾茲海默病的基礎(chǔ)研究中使用的模型小鼠的腦半球的切片上被廣泛利用。最后，在神經(jīng)學(xué)的標(biāo)本中，有自身熒光的標(biāo)本占大部分，這會(huì)妨礙觀察，所以能夠消除熒光模糊是很大的優(yōu)點(diǎn)?？傊?，雖然柏林的夏里特醫(yī)院神經(jīng)-病理學(xué)研究所在事關(guān)顯微鏡的條件上涉及面很廣，但是熒光顯微成像系統(tǒng)BZ均可以滿足。