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應(yīng)用MALDI高能和低能碰撞裂解技術(shù)研究二硫鍵重排

閱讀:160        發(fā)布時(shí)間:2015-8-4

AmmodytoxinsAtxs)是長鼻蛇分泌的一種潛在的神經(jīng)毒素。AtxsA、B C)通過刺激神經(jīng)末稍乙酰膽堿的釋放,從而抑制細(xì)胞分離引起細(xì)胞損傷、凋亡甚至死亡。Atxs 類毒素在氨基酸組成上具有很高的同源性,在組成毒素蛋白的122 個(gè)氨基酸中有177 個(gè)氨基酸殘基是相同的。在Atxs 類毒素中,14 個(gè)半胱氨酸形成7 個(gè)二硫鍵。 利用島津MALDI TOF-TOF,采用PSD(低能碰撞)和CID 模式(高能碰撞)對(duì)Atxs 多肽RCCFVHD 進(jìn)行分子內(nèi)氧化態(tài)和還原態(tài)二硫鍵研究,獲得更加豐富的結(jié)構(gòu)信息。甲酸切除處理經(jīng)過DTT 還原的Atxs 蛋白能夠獲得很好的序列覆蓋度;在所研究的多肽中,高能CID 能夠很好的識(shí)別Atxs 的氨基酸序列信息;低能PSD 模式主要提供a-、b-y-型離子信息;高能CID 能夠提高整個(gè)碎片離子的強(qiáng)度,并且通過d-w-型離子的信息提供側(cè)鏈的相關(guān)結(jié)構(gòu)信息。

 

 

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