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本文由中國藥科大學(xué)藥物代謝與藥代動力學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室發(fā)表于Journal of Chromatography A, 1217 (2010) 4971–4979。

迄今為止，中藥的藥代動力學(xué)研究仍處于起步階段，在生物基質(zhì)復(fù)雜組分的定性和定量分析方面面臨著嚴(yán)峻的技術(shù)挑戰(zhàn)。此外，缺乏標(biāo)準(zhǔn)品是評估中藥藥代動力學(xué)的另一個瓶頸。本項(xiàng)工作借助液相色譜-離子阱-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-IT-TOF/MS），開發(fā)了一個用于中藥成分的定性和定量藥代動力學(xué)分析的強(qiáng)大技術(shù)平臺，并提出一個無需標(biāo)準(zhǔn)品的相對暴露策略，用于藥代動力學(xué)評估。

以五味子木脂素提取物（SLE）為例，將LC-IT-TOF/MS法用于SLE本身和SLE給藥后大鼠血漿中所含成分的全面定性分析。隨后，本研究通過與成熟的LC-Q/MS分析方法的比較，來驗(yàn)證LC-IT-TOF/MS分析方法的定量性能。對于有標(biāo)準(zhǔn)品的5種木脂素組分的絕對定量，兩種分析方法顯示出非常相似的優(yōu)點(diǎn)，如線性、精密度、準(zhǔn)確度和藥代動力學(xué)參數(shù)。與LC-Q/MS法相比，LC-IT-TOF/MS法的突出優(yōu)點(diǎn)是靈敏度更高。

此外，開發(fā)了一種“相對暴露方法”（REA），該方法無需每種成分的標(biāo)準(zhǔn)品，而是使用順序稀釋的原始中藥制劑來制備“混合校準(zhǔn)曲線”，以評估中藥藥代動力學(xué)。這種方法與有標(biāo)準(zhǔn)品的典型藥代動力學(xué)分析相比，能夠提供除了絕對血漿濃度之外，幾乎相同的藥代動力學(xué)參數(shù)。該方法將廣泛應(yīng)用于但不限于中藥的定性和定量藥代動力學(xué)分析。

表1 LC-IT-TOF/MS和LC-Q/MS檢測大鼠血漿中五味子醇A、五味子醇B、五味子甲素A、五味子甲素B、五味子酯A的含量、精密度和準(zhǔn)確度

圖1 LC-IT-TOF/MS和LC-Q/MS測定的5種木脂素的血漿濃度與時間的關(guān)系

(A)五味子醇A、(B)五味子醇B、(C)五味子甲素A、(D)五味子甲素B、(E)五味子酯A

圖2 用LC-IT-TOF/MS測定21種木脂素的血漿藥代動力學(xué)

圖3 基于LC-IT-TOF/MS測定的REA和基于LC-Q/MS測定的絕對曝光法計(jì)算的AUC和Cmax值

圖4 開發(fā)的基于LC-IT-TOF/MS的中藥藥代動力學(xué)分析平臺和工作流程

缺乏強(qiáng)大的分析平臺仍然是評估復(fù)雜中藥藥代動力學(xué)和藥物分布的主要障礙。除了技術(shù)上的挑戰(zhàn)，缺乏標(biāo)準(zhǔn)品是描述中藥藥代動力學(xué)的另一個巨大和長期的障礙。為了解決這一問題，我們在本研究中開發(fā)了一種相對暴露方法，該方法基于在校準(zhǔn)樣品中添加相應(yīng)的草藥制劑的校準(zhǔn)方程來計(jì)算每個成分的相對血漿濃度。除絕對血藥濃度外，該方法可成功獲得所有重要的藥代動力學(xué)參數(shù)，所得結(jié)果與用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)的典型測定結(jié)果基本一致。

因此，本研究基于單一LC-IT-TOF/MS平臺，無需驗(yàn)證和校準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)品，建立了一個系統(tǒng)的方法來解決中藥藥代動力學(xué)領(lǐng)域的關(guān)鍵問題，對數(shù)十個目標(biāo)成分和非目標(biāo)成分進(jìn)行定性和定量測定。

文獻(xiàn)題目

《Qualitative and quantitative determination of complicated herbal components by liquid chromatography hybrid ion trap time-of-?ight mass spectrometry and a relative exposure approach to herbal pharmacokinetics independent of standards》

使用儀器

島津LC–IT-TOF/MS

作者

Yan Liang^a, Haiping Hao^a,∗, An Kang^a, Lin Xie^a, Tong Xie^a, Xiao Zheng^a, Chen Dai^a, Leren Wan^b,

Longsheng Sheng^a, Guangji Wang^a,∗∗

a Key Lab of Drug Metabolism & Pharmacokinetics, China Pharmaceutical University, No. 24, Tongjiaxiang Street, Nanjing 210009, China

b Shanghai Of?ce, Shimadzu (Hongkong) Limited Co, No. 381, Futexi Road, Shanghai 200020, China

∗ Corresponding author. Tel.: +86 25 83271179; fax: +86 25 83271060.

∗∗ Corresponding author. Tel.: +86 25 83271128; fax: +86 25 83302827.