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文獻解讀丨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對中藥制劑中非目標(biāo)成分的全面檢測與鑒定及其策略

閱讀:713        發(fā)布時間:2021-4-26

 

 

本論文發(fā)表在Anal. Chem.(2008)80,8187-8194,介紹了中國藥科大學(xué)儀器分析中心藥物代謝與藥代動力學(xué)重點實驗室團隊通過液相色譜-離子阱-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)建立的對中藥制劑中非目標(biāo)成分的全面檢測與鑒定方法。

 

雖然現(xiàn)有文獻記載了許多從草藥制劑中鑒定成分的報告,但大多局限于目標(biāo)成分。本文利用液相色譜-離子阱-飛行時間質(zhì)譜(LC/MS-IT-TOF)技術(shù),提出了一種全新的、通用的中草藥制劑中非目標(biāo)成分的鑒定方法。最初開發(fā)了一個簡單的程序,用于從所有實驗生成的離子中搜索常見的診斷離子。在此基礎(chǔ)上,將具有相同離子的組分(質(zhì)量誤差<5mDa)分為一個家族,再通過存在于兩個或更多家族中的橋接組分將各家族連接成連貫的網(wǎng)絡(luò)。構(gòu)建該網(wǎng)絡(luò)的好處在于,一旦某單一組分被重新鑒定,就可以依次描述所有診斷離子的結(jié)構(gòu)。

 

診斷離子的結(jié)構(gòu)可以作為“先驗”信息,用于從主數(shù)據(jù)庫中選擇包含相應(yīng)診斷離子子結(jié)構(gòu)的精確候選離子。這種策略使數(shù)據(jù)庫訪問范圍縮小了近7倍,從而大大提高了分析效率和清晰度。通過使用這種方法,納入網(wǎng)絡(luò)的53個成分中有43個已成功地從供試草藥制劑中識別出來。對于其余的成分,該方法未能識別; 根據(jù)片段之間的準確質(zhì)量差異,建立了一種通過特定化學(xué)基團的連續(xù)丟失進行篩選的補充方法,以縮小數(shù)據(jù)庫訪問量。除未能區(qū)分某些異構(gòu)體外,兩種方法的聯(lián)合應(yīng)用成功地鑒定了87個峰。目前開發(fā)的方法和原則有助于從各種復(fù)雜混合物(如草藥制劑、生物和環(huán)境樣品)中識別復(fù)雜的非目標(biāo)成分。

 

 

 

采用LC/MS-IT-TOF法對MLN注射液進行負離子模式下的總離子色譜分析(a)MAX柱提取(b)HLB柱提取

 

  

根據(jù)橋接組分建立的家族網(wǎng)絡(luò)

 

在明確識別非目標(biāo)組分方面,目前開發(fā)的策略和方法仍有一定的局限性。首先,結(jié)合碎片比較方法的數(shù)據(jù)庫查詢在很大程度上取決于現(xiàn)有化學(xué)數(shù)據(jù)庫的性能和信息含量,這意味著如果檢測到的成分沒有包括在目標(biāo)化學(xué)數(shù)據(jù)庫中,就不可能通過這種方法來識別這類成分。

 

第二,當(dāng)在某些條件下不能產(chǎn)生相應(yīng)的診斷離子時,診斷離子引導(dǎo)的族分類策略可能無法包含某些組分。而LC/MS譜圖又會受應(yīng)用的條件所限,為了解決這一限制,碎裂應(yīng)在多個CID能量下進行,以產(chǎn)生足夠的高響應(yīng)碎片。

 

第三,受制于LC/MS方法學(xué)的固有局限,僅僅依靠LC/MS永遠不足以明確識別非目標(biāo)組分。由于這些局限性,我們不能排除某些組分的錯誤識別的可能性,特別是那些其真實結(jié)構(gòu)沒有被納入目標(biāo)化學(xué)數(shù)據(jù)庫的成分。通過對兩種復(fù)方制劑非目標(biāo)成分的鑒定,證明了該方法的有效性和應(yīng)用價值。這些限制并不妨礙它廣泛應(yīng)用于從各種復(fù)雜基質(zhì)中識別非目標(biāo)成分。從復(fù)雜混合物中鑒定非目標(biāo)化合物在制藥、代謝組學(xué)、環(huán)境分析等許多領(lǐng)域都具有重要意義。鑒于這些混合物中所含的化合物在結(jié)構(gòu)上也是相關(guān)的,并且可以歸類為家族,因此我們的策略將不僅在草藥制劑中得到廣泛的應(yīng)用,也將在許多其他復(fù)雜混合物中得到廣泛的應(yīng)用,如環(huán)境和生物樣品。

 

 

 

 

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