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一、PCR產(chǎn)物的T載體克?。ㄒ唬┲亟MT質(zhì)粒的構(gòu)建一．原理外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組，這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下，有Mg2+、ATP存...

1975年，Kohler和Milstein發(fā)現(xiàn)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和綿羊紅細(xì)胞免疫的小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行融合，形成的雜交細(xì)胞既可產(chǎn)生抗體，又可無限增殖，從而創(chuàng)立了單克隆抗體雜交瘤技術(shù)。這一技術(shù)上的突破不僅為醫(yī)學(xué)...

蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生物體內(nèi)重要的共價(jià)修飾方式之一。蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化這一可逆過程幾乎調(diào)節(jié)著包括細(xì)胞的增殖、發(fā)育、分化、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡、神經(jīng)活動(dòng)、肌肉收縮及腫瘤發(fā)生等過程在內(nèi)的所有生命活動(dòng)。...

1、DNA的缺口平移法缺口平移是一種快速、簡(jiǎn)便、成本相對(duì)較低以及生產(chǎn)高比活性均一標(biāo)記DNA的方法。該技術(shù)可以制備序列特異的探針。當(dāng)使用重組質(zhì)粒探針時(shí)，雖然任何形式的雙鏈DNA都可以進(jìn)行缺口平移標(biāo)記。但...

一、GST融合蛋白GST（谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶）能特異的與谷胱甘肽結(jié)合，表現(xiàn)為酶和底物的作用原理，利用這個(gè)原理，將GST做成標(biāo)簽表達(dá)出融合蛋白，與帶谷胱甘肽配基的親和介質(zhì)特異性結(jié)合，從而純化出目標(biāo)蛋白，GS...

1、技術(shù)原理首先通過PCR擴(kuò)增含有SNP的基因[1]組片段，然后通過序列特異性引物實(shí)現(xiàn)單堿基延伸，隨后樣品分析物與芯片基質(zhì)共結(jié)晶后在真空管中受瞬時(shí)納秒(10-9s)強(qiáng)激光激發(fā)。核酸分子因此解吸附成為單...

抗體片段化，就是用工具（蛋白酶及化學(xué)物質(zhì)）將抗體分子切成特定大小的片段。Why？因?yàn)樵趯?shí)際運(yùn)用時(shí)，抗體分子真的太大了！抗體分子的分子量一般為幾百道爾頓（例如IgM五聚體就更龐大了），分子直徑在10nm...

本文匯總了流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)中常見問題（無法標(biāo)記、PE抗體檢測(cè)不到但FITC可檢測(cè)到、非特異性染色、熒光強(qiáng)度弱、散射光信號(hào)異常、結(jié)果與預(yù)期相反等），并給出了各種可能的原因以及對(duì)應(yīng)的解決方法，希望對(duì)您實(shí)驗(yàn)有...

轉(zhuǎn)錄組是某個(gè)物種或者特定細(xì)胞類型產(chǎn)生的所有轉(zhuǎn)錄本的集合，轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)是zui近發(fā)展起來的利用深度測(cè)序技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄分析的方法,可以對(duì)全轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行系統(tǒng)的研究。RocheGSFLXTitan...

Hi-C(High-throughchromosomeconformationcapture)是以整個(gè)細(xì)胞核為研究對(duì)象，利用高通量測(cè)序技術(shù)，結(jié)合生物信息分析方法，研究全基因組范圍內(nèi)整個(gè)染色質(zhì)DNA在空...