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識(shí)破支原體污染,拯救你的細(xì)胞支原體(mycoplasma)是一種沒(méi)有細(xì)胞壁的小原核細(xì)胞。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體污染率達(dá)到60%以上,當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,污染嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,并出現(xiàn)細(xì)胞病變。因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,防止支原體污染是一個(gè)世界性的難題。圖1支原體污染細(xì)胞后,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變(來(lái)源:該圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò))支原體污染細(xì)胞后很難察覺(jué),同時(shí)若細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程受到了支原體污染,*清除支原體也是非常困難的。因此在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程
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FFPE樣本是什么?做病理的小伙伴對(duì)FFPE樣本肯定不陌生,F(xiàn)FPE(Formalin-FixedandParrffinEmbedded)樣本是福爾馬林固定石蠟包埋的樣本,固定包埋的方法能夠使組織在常溫保存很長(zhǎng)時(shí)間。早FFPE樣本主要是用于病理形態(tài)學(xué)觀察,近些年,隨著精////準(zhǔn)醫(yī)療的滲透發(fā)展,F(xiàn)FPE樣本在臨床病理檢驗(yàn)、腫瘤基因檢測(cè)中也得到廣泛使用。圖1FFPE樣本人們將FFPE樣本中的核酸提取出來(lái)進(jìn)行建庫(kù),然后利用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)FFPE樣本的核酸進(jìn)行測(cè)序和分析,就能得到病理和腫瘤相關(guān)的很多
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“開(kāi)弓沒(méi)有回頭箭”,核酸質(zhì)量是分子實(shí)驗(yàn)成功的基礎(chǔ)核酸提取是實(shí)驗(yàn)室蕞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn),我們經(jīng)常會(huì)抽提基因組或者總RNA,少則幾份,多則上百份。準(zhǔn)備提取材料,加入TRIzol或裂解液,加入氯////仿、異丙醇,純化柱或手提進(jìn)行核酸沉淀和洗滌、洗脫,半小時(shí)后就可以得到核酸樣本。因?yàn)樘崛?shí)驗(yàn)太平常,以至于我們從來(lái)沒(méi)有思考過(guò)這個(gè)實(shí)驗(yàn)背后的問(wèn)題。大家通常測(cè)濃度、測(cè)比值,而教科書(shū)中已明確告知我們測(cè)出來(lái)數(shù)值(純粹核酸的比值范圍是固定的)代表了核酸品質(zhì),但偏離標(biāo)準(zhǔn)范圍的數(shù)值往往被忽視,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響往往得不到很好的解釋
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基因測(cè)序的這些年P(guān)art1測(cè)序平臺(tái)的發(fā)展歷程1865年,Sanger提出的雙脫氧末端終止測(cè)序法后對(duì)于基因序列測(cè)定方法具有極///大的推動(dòng)作用。隨后為了彌補(bǔ)一代測(cè)序通量低的缺點(diǎn),通量更高的二代測(cè)序技術(shù)以及讀長(zhǎng)更長(zhǎng)的三代測(cè)序技術(shù)迅速發(fā)展起來(lái)。在此小翊為大家整理了從一代到三代測(cè)序平臺(tái)以及有代表性測(cè)序儀器的發(fā)展歷程。圖1測(cè)序平臺(tái)的發(fā)展歷程Part2二代測(cè)試的風(fēng)華年代各大公司對(duì)于二代測(cè)序市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)史相當(dāng)激烈的,目前在市場(chǎng)中占有穩(wěn)固地位的主要是Illumina、MGI(華大智造)以及LifeTechnolo
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美國(guó)所謂的“凈網(wǎng)計(jì)劃”,IVD行業(yè)會(huì)不會(huì)是下一個(gè)目標(biāo)?
美國(guó)所謂的“凈網(wǎng)計(jì)劃”,IVD行業(yè)會(huì)不會(huì)是下一個(gè)目標(biāo)?IVD,即體外診斷,是醫(yī)療器械的第—大市場(chǎng),它主要分為4大賽道:生化診斷、免疫診斷、分子診斷、POCT。其中分子診斷被稱為IVD的黃金賽道,分子診斷技術(shù)的迭代創(chuàng)新,催化了行業(yè)格局日新月異的變化。近些年來(lái),分子診斷方興未艾,其中二代高通量測(cè)序(NGS)一騎領(lǐng)///先,憑借不斷增加的檢測(cè)通量和日益降低的檢測(cè)成本,帶動(dòng)了臨床應(yīng)用的突破,大大推動(dòng)了分子診斷在遺傳病、病原體、癌基因檢測(cè)等領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展。在腫瘤領(lǐng)域,頭部公司燃石醫(yī)學(xué)、泛生子于今年6月先后 -
PCR-Free建庫(kù),你get到了嗎?高通量測(cè)序中,常規(guī)的文庫(kù)構(gòu)建需要PCR擴(kuò)增,一方面,是為了對(duì)微量DNA樣本進(jìn)行擴(kuò)增,提高文庫(kù)產(chǎn)量,另一方面,可以放大熒光信號(hào),讓測(cè)序儀更容易捕獲和識(shí)別熒光信號(hào),提高測(cè)序準(zhǔn)確度。但是,PCR就像一把“劍”,在解決了樣本起始量低的問(wèn)題并起到放大熒光信號(hào)作用的同時(shí),卻也引入了擴(kuò)增錯(cuò)誤和偏向性,不能地呈現(xiàn)基因組序列“真實(shí)面貌”。因此,PCR-Free技術(shù)的引入,既具備了PCR的優(yōu)勢(shì),也克服了PCR的缺點(diǎn)。什么是PCR-Free技術(shù)?常規(guī)NGS文庫(kù)構(gòu)建的核心步驟為:基
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新品上新|植物rRNA去除試劑盒,看得見(jiàn)的去除效率!近,有小伙伴私信小翊,抱怨轉(zhuǎn)錄組建庫(kù),后得到的有效信息和耗費(fèi)的財(cái)力、物力、人力、時(shí)間相比,簡(jiǎn)直是九牛二毛。歸根到底,竟是rRNA惹的禍。轉(zhuǎn)錄組(transcriptome)是指在某一特定生理?xiàng)l件下,細(xì)胞、組織或者生物體內(nèi)所有轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的集合,即轉(zhuǎn)錄出來(lái)的所有RNA的總和,包括編碼RNA(mRNA)和非編碼RNA(tRNA、rRNA、miRNA、lncRNA、circRNA)等不同類型的RNA分子,其中,rRNA約占RNA總量的80%以上,是多的一
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產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號(hào)規(guī)格價(jià)格(元)Timentin特美汀60230ES073.2g256.00產(chǎn)品描述特美汀對(duì)革蘭陽(yáng)性菌、陰性菌、需氧及厭氧菌的抗菌范圍甚廣。其組分為替卡西林鈉及克拉維酸鉀(TicarcillinSodiumandClavulanatePotassium),按有效酸計(jì),替卡西林鈉與克拉維酸鉀的配比為15:l,替卡西林是青霉素類殺菌試劑,而克拉維酸則是一種不可逆性高效β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。多種革蘭氏陽(yáng)性菌(G+)和陰性菌(G-)都能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶,這類酶能在青霉素作用于病原體之