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qPCR常見問題及解決方案（建議收藏，文末有彩蛋哦~）在RT-qPCR的實(shí)驗(yàn)過程中，大家或多或少都會遇到擴(kuò)增曲線異常、溶解曲線異常、重復(fù)性差等問題。小翊給大家整理了SYBRGreen染料法的常見問題及解決方案，以供大家參考。Part1擴(kuò)增曲線異常正常的擴(kuò)增曲線一般呈S型，Ct值///好在20-30之間。異常的擴(kuò)增曲線包括Ct值偏大、無平臺期、平臺期下降等問題。1.Ct值偏大（如Ct值＞30）1）模板量低或基因表達(dá)豐度低，建議增加模板量觀察Ct值能否成相應(yīng)倍數(shù)減少。2）qPCR整個反應(yīng)條件不適宜或
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保姆式RNA提取試劑盒，打造11min提取神話幾個月前，我們跑了一圈市場，發(fā)現(xiàn)許多朋友對“TRIzol類試劑”提取RNA的方式吐槽的非常激烈，支持和反對的聲音都有：這些言語，每一條都讓我感同身受，沒想到因?yàn)橐粋€RNA提取實(shí)驗(yàn)，引發(fā)了很多的思考和討論。說到底，定量實(shí)驗(yàn)是分子實(shí)驗(yàn)的基石，RNA提取又是定量實(shí)驗(yàn)的開端。這種實(shí)驗(yàn)總是會有說不完的辛酸歷史，講不盡的無奈故事。但是，我們想借翊圣生物MolPure®CellRNAKit（培養(yǎng)細(xì)胞RNA提取試劑盒），一個集使用簡便、安全無毒與11min超快體驗(yàn)感
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一夫當(dāng)關(guān)，莫如雙管齊下——聚焦熱啟動TaqDNA聚合酶雙封閉抗體當(dāng)下基于PCR技術(shù)的核酸檢測仍有其應(yīng)用難點(diǎn)難點(diǎn)→檢測試劑的穩(wěn)定性核酸檢測行業(yè)人都格外關(guān)注檢測試劑的穩(wěn)定性，不管是長期儲存穩(wěn)定性還是短期偏離正常保存條件的穩(wěn)定性，都直接影響檢測結(jié)果的有效性。而短期偏離正常保存條件的穩(wěn)定性在實(shí)際使用和運(yùn)輸過程中尤為重要，比如遇到樣本量大、適配自動化、排隊(duì)等待上機(jī)等情況，反應(yīng)體系需要在室溫或4℃放置，再比如遇到運(yùn)輸時間長，溫度難以控制，檢測體系就暴露在風(fēng)險之下。如何保證穩(wěn)定性，如何確保檢測結(jié)果有效、可信，
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干貨分享|qPCR復(fù)孔平臺期熒光信號不同會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果嗎？
干貨分享|qPCR復(fù)孔平臺期熒光信號不同會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果嗎？王老師：您好，近用你們的試劑跑qPCR，復(fù)孔平臺期的熒光信號不同，這樣的結(jié)果能用嗎？小翊：您好，老師。從圖中來看，復(fù)孔重復(fù)性是比較好的，△Ct值沒什么問題的。王老師：那為什么復(fù)孔的平臺期信號還有相差呢？有什么方法可以使復(fù)孔熒光信號一致嗎？近有不少客戶咨詢小翊類似的問題，擔(dān)心這樣的數(shù)據(jù)不可靠今天小翊就幫您解除疑慮！復(fù)孔平臺期不同不會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果（△Ct0.5）*，理想的PCR擴(kuò)增是使DNA分子由1變2，2變4，以2n進(jìn)行擴(kuò)增的。但實(shí)際上，隨 -
高品質(zhì)、高成功率動物腸炎建模用Yeasen葡聚糖硫酸鈉鹽
高品質(zhì)、高成功率動物腸炎建模用Yeasen葡聚糖硫酸鈉鹽穩(wěn)定、高效，物有所值！葡聚糖硫酸鈉鹽（dextransulfatesodiumsalt,DSS）是葡聚糖的聚陰離子衍生物，由葡聚糖和氯//磺//酸的酯化反應(yīng)形成，白色粉末，在水或鹽溶液中溶解得到澄清溶液翊圣生物利用*的生產(chǎn)工藝開發(fā)的DSS包含了分子量1,500~500,000Da范圍內(nèi)的多個產(chǎn)品，硫含量17-19%。其中分子量為36000-50000Da的DSS產(chǎn)品，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼{(diào)整DSS濃度和給藥時間，建立急性、慢性和急慢性交替性模型。 -
Carrier RNA常見類型、作用原理及優(yōu)缺點(diǎn)介紹
CarrierRNA常見類型、作用原理及優(yōu)缺點(diǎn)介紹1.CarrierRNA概念及作用熒光定量PCR是分子診斷主流技術(shù)，包括核酸提取和PCR擴(kuò)增兩個環(huán)節(jié)，兩者共同決定了該檢測方法的評測參數(shù)。以直觀關(guān)鍵的檢測靈敏度指標(biāo)來看，只有實(shí)現(xiàn)了提取環(huán)節(jié)///優(yōu)化和PCR擴(kuò)增環(huán)節(jié)///優(yōu)化的情況下，檢測靈敏度的結(jié)果才更可信。檢測靈敏度顯示了檢測試劑的檢測下限，對于熒光定量PCR而言，即一定樣本濃度下的病毒核酸檢出率。CarrierRNA，中文名載體RNA，又叫核酸助沉劑。在核酸提取環(huán)節(jié)，提取使用到的離心管壁多是 -
無需gDNA提取的基因分型產(chǎn)品，您值得擁有！基因分型是通過使用生物學(xué)試驗(yàn)檢查個體的DNA序列的過程，也是將目標(biāo)序列與另一個體的序列或參考序列進(jìn)行比較來確定個體的基因型差異的過程。PCR是一種常見的基因分型方法，用于檢測轉(zhuǎn)基因研究確定目標(biāo)基因是否存在?；赑CR方法的基因分型一般需要處理樣本，抽提純化基因組DNA。當(dāng)待測樣本較多時，抽提純化基因組gDNA的過程費(fèi)時、操作重復(fù)，通量低并且實(shí)驗(yàn)成本高。為了解決樣本抽提純化這一難題，翊圣生物通過改造TaqDNA聚合酶，優(yōu)化PCR反應(yīng)體系開發(fā)出無需基因組純
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轉(zhuǎn)染效率低？小翊手把手教你做轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
轉(zhuǎn)染效率低？小翊手把手教你做轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)細(xì)胞膜是由磷脂雙分子層和鑲嵌蛋白組成的，帶有負(fù)電荷。因此帶有負(fù)電荷的DNA或RNA無法通過細(xì)胞膜。為了讓核酸（DNA或RNA）通過細(xì)胞膜，研究人員利用不同的方法，包括使用化學(xué)物質(zhì)和包被核酸的載體分子進(jìn)行中和，以及在細(xì)胞膜上開孔等物理方法，將核酸（DNA或RNA）直接運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)。這些就是轉(zhuǎn)染的過程，轉(zhuǎn)染的目的是促進(jìn)蛋白合成，調(diào)節(jié)基因表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞生長與發(fā)育等，目前越來越多地被用到功能研究中。圖1DNA/RNA轉(zhuǎn)染過程（圖片來源：圖片來源于網(wǎng)絡(luò)）1.常見轉(zhuǎn)染方法
