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上?;鄯f生物科技有限公司

MG63細(xì)胞| MG63細(xì)胞系 培養(yǎng)步驟

時間:2020-7-13閱讀:3996

MG63細(xì)胞| MG63細(xì)胞系 培養(yǎng)步驟

產(chǎn)品名稱:MET-5A細(xì)胞

中文名稱:人骨肉瘤細(xì)胞;MET-5A

規(guī)格:T25

供應(yīng)商:上?;鄯f生物科技有限公司

復(fù)蘇周期:10個工作日左右

 

培養(yǎng)步驟:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

 

1、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。

2、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

 

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。

 

慧穎生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,擁有獨立細(xì)胞房(可隨時約定參觀),供應(yīng)胎牛血清,無血清細(xì)胞凍存液,無血清培養(yǎng)基,常規(guī)培養(yǎng)基,胰酶,雙抗,*培養(yǎng)基,STR鑒定細(xì)胞,感受態(tài)細(xì)胞等,專業(yè),專注,性價比高,是您Shou選之家。

 

熱賣細(xì)胞:

細(xì)胞名稱

英文簡稱

細(xì)胞類型

小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光酶標(biāo)記

4T1-LUC

細(xì)胞系

SD大鼠脂肪干細(xì)胞+RFP

原代細(xì)胞-RFP

原代細(xì)胞

綿羊肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞

OAR-L1

原代細(xì)胞永生化

奶山羊乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

原代SV40永生化

原代細(xì)胞永生化

人肺癌細(xì)胞紅色標(biāo)記

A549-RFP

細(xì)胞系

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株系

HCT-15/Taxol

細(xì)胞系耐藥株

人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株

HCT-15/FU

細(xì)胞系耐藥株

人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞

U251MG/TMZ-luc

細(xì)胞系

人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞

U251MG/TMZ

構(gòu)建耐藥株

人慢性骨髓性白血病細(xì)胞阿霉素

K562/ADR

細(xì)胞系耐藥株

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤紅色標(biāo)記

U-87MG-RFP

細(xì)胞系

人皮膚成纖維細(xì)胞 

HSF

原代細(xì)胞永生化

人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記

原代細(xì)胞-GFP

原代細(xì)胞

人臍靜脈內(nèi)皮紅色RFP標(biāo)記

HUVEC-RFP

細(xì)胞系

人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記

HUVEC-GFP

細(xì)胞系

人臍靜脈內(nèi)皮

HUV-EC-C

細(xì)胞系

人前庭鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株

Mcf-7/adr

細(xì)胞系耐藥株

人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

MCF7-luc

細(xì)胞系

人三陰性乳腺癌

MDA-MB-231-luciferase

細(xì)胞系

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染突變型

細(xì)胞系

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染野生型

細(xì)胞系

人胰腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株

PANC-1/GEM

細(xì)胞系耐藥株

人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人胰腺腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人胰腺腫瘤相關(guān)成纖維永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人轉(zhuǎn)移灶淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

小鼠附睪脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

HEPA1-6-LUC

細(xì)胞系

小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞

K7M2WT-LUC

細(xì)胞系

小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

小鼠胰腺星狀細(xì)胞永生化

 

原代細(xì)胞永生化

C57小鼠脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

鴨胚成纖維細(xì)胞永生化

Duck embryo

原代細(xì)胞永生化

鴨胚肝間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

中國倉鼠卵巢細(xì)胞 CHO-K1懸浮細(xì)胞

 CHO-K1懸浮細(xì)胞

馴化細(xì)胞系

豬(杜洛克,萊蕪)腹部脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

豬扁桃體上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

豬肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

豬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

豬鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

兔肝臟間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞

 

原代細(xì)胞永生化

 

 

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