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Diol二醇基色譜柱的應(yīng)用與保養(yǎng)知識(shí)

時(shí)間:2020-5-8 閱讀:4266
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   Diol二醇基色譜柱在正相系的分析中,可以獲得高于色譜柱的保留容量。且由于其化學(xué)鍵合了與硅膠有著不同性質(zhì)的羥基,因此在正相分析下,其填充劑的選擇范圍相對(duì)更大采用了化學(xué)處理技術(shù),從而實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定的化學(xué)修飾。為此,其同樣可以放心地使用于正相制備HPLC中。此外,與硅膠有所不同的是,由于它可以通入水洗提液,因此能夠較容易地清洗掉吸附于色譜柱上的極性雜質(zhì)成分。
 
  它主要應(yīng)用于可用于多肽,蛋白,以及極性藥物分子等的分離,該色譜柱具有應(yīng)用特點(diǎn)為:超純?nèi)嗫浊蛐喂枘z提高了色譜柱分離的穩(wěn)定性并具有良好的對(duì)稱峰形和高柱效;以*的表面修飾方法確保硅膠表面的惰性,均一性,和重現(xiàn)性;優(yōu)良的批與批和柱與柱間的重現(xiàn)性。對(duì)于分離多肽,蛋白,以及極性藥物分子等無(wú)疑是一個(gè)較佳的選擇。
 
  Diol二醇基色譜柱的保養(yǎng)知識(shí):
  pH避免在pH低于2或高于9的條件下使用。較高的pH會(huì)溶解硅膠,從而使部分或全部的氰丙基鏈從硅膠表面脫落,引起分離效率的降低和保留時(shí)間的改變。為了獲得很好的分離效果和延長(zhǎng)柱的使用壽命,請(qǐng)盡量使用pH在2-8范圍內(nèi)的流動(dòng)相。
 
  壓力盡管它可在高至5000psi的壓力下使用,但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?000psi。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來(lái)源于流速,因此流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言,柱壓會(huì)隨著色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下,建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。
 
  溫度操作溫度為60攝氏度。長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作也會(huì)損壞色譜柱,這種情形在高的pH條件下特別突出。
 
  儲(chǔ)藏長(zhǎng)期不用時(shí),請(qǐng)不要讓水或緩沖液存留在色譜柱中。在替代緩沖液時(shí),請(qǐng)用至少20-30倍柱體積的50%甲醇(或乙腈)水溶液沖洗色譜柱,再用20-30倍柱體積的純有機(jī)溶劑如乙腈等進(jìn)行沖洗。每根色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中均會(huì)附有兩個(gè)可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸,請(qǐng)用堵頭塞緊色譜柱的兩端。

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