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北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

尿液中對(duì)硝基酚的檢測——UPLC-MS/MS法

時(shí)間:2016-9-9 閱讀:4349
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對(duì)硝基酚是我國68 種優(yōu)先控制污染物之一,也是種重點(diǎn)控制的污染物之一。廣泛的應(yīng)用于農(nóng)藥、制藥工業(yè)、殺蟲劑以及染料行業(yè),具有致癌、致畸、致突變的潛在毒性。

目前硝基酚類的測定方法有氣相色譜法、液相色譜法、紫外分光光度法、熒光光譜法和毛細(xì)管電泳法等。氣相色譜法在定量分析時(shí),常需要用已知物純樣品對(duì)檢測后輸出的信號(hào)進(jìn)行校正,分光光度法準(zhǔn)確度不高,以上方法都普遍存在靈敏度不足的明顯缺憾。液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜的聯(lián)用則能避免這一問題。

方法優(yōu)勢:

迪馬科技開發(fā)的《尿液中對(duì)硝基酚的檢測》,采用固相萃取-超液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定人尿中的對(duì)硝基酚,以濃鹽酸作為提取液,采用ProElut PXL 固相萃取柱凈化樣品,通過UPLC-MS/MS檢測;方法定量限是5 μg/kg。本方案前處理步驟簡單、凈化效果好,基質(zhì)效應(yīng)小且檢測時(shí)間短;準(zhǔn)確度高,重現(xiàn)性好。

柱優(yōu)勢:

ProElut PXL 柱填料由多種吸附劑按照一定的比例分層填裝而成,采用多種作用機(jī)理去除尿液中尿酸、尿素等雜質(zhì),適用于尿液中對(duì)硝基酚的檢測。本產(chǎn)品是商品化的成品柱,吸附劑穩(wěn)定性好,不受外界環(huán)境因素影響,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性;過柱過程中操作步驟簡單,有機(jī)溶劑用量少,減少對(duì)人體的危害同時(shí)提高工作效率。

以下為詳細(xì)解決方案,敬請(qǐng)參考!

尿液中對(duì)硝基酚的檢測——UPLC-MS/MS法

1、適用范圍

本方案適用于尿液中對(duì)硝基酚的檢測,本方法定量限是5 μg/kg。

2、提取

取10 g樣品,加入2 mL濃鹽酸,沸水浴60 min,冷卻至室溫,待凈化。

 

3、凈化——ProElut PXL 3 mL(Cat#:65920)

a活    化:

加入5 mL甲醇、5 mL水,流出液棄去;

b上    樣:

將待凈化液加入小柱,流出液棄去;

c淋    洗:

加入3 mL 30%甲醇水淋洗小柱,流出液棄去;

d洗    脫:

加入3 mL 80%甲醇水,收集洗脫液,并用水定容至10 mL,過微孔濾膜供LC-MS分析。

4、分析條件

4.1 UPLC條件

色譜柱:Leapsil C18,100 x 2.1mm,2.7 μm(Cat#:86005)

流  速:0.3 mL/min

進(jìn)樣量:5 μL 

柱  溫:35 ℃

流動(dòng)相:10 mmol/L乙酸銨:乙腈=8:2  

4.2 質(zhì)譜條件

電離模式:ESI                          掃描方式: 負(fù)離子掃描

描檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測                 電噴霧電壓:-4500 V

霧化氣壓力:50 psi                     輔助氣壓力:50 psi

氣簾氣壓力:20 psi                     離子源溫度:500 ℃

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

化合物名稱

定性離子對(duì)

(m/z)

(母離子/子離子)

定量離子對(duì)

(m/z)

(母離子/子離子)

碰撞氣能量/ev

去簇電壓/V

對(duì)硝基酚

138.0/107.8

138.0/107.8

-24.7

-63

138.0/92.2

-30.0

-63

5、添加回收結(jié)果

人尿中對(duì)硝基酚的HPLC檢測添加回收結(jié)果

分析物

添加水平(μg/kg)

回收率(%)

對(duì)硝基酚

5

100.96

20

102.48

100

99.37

 

1.jpg

對(duì)硝基酚10.0 μg/L MRM色譜圖

2.jpg

對(duì)硝基酚標(biāo)準(zhǔn)10.0 μg/L XIC色譜圖

 

尿液中對(duì)硝基酚的檢測——UPLC-MS/MS法相關(guān)產(chǎn)品信息:

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

樣品前處理

65920

ProElut PXL

3 mL,50/pk

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

12位

4803

1,3,6mL柱管通用連接器

15/pk

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正壓兩用泵,無油

1/pk

99013

抽濾瓶套裝

(包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)

1/pk

30039

FitMax針頭式過濾器 Nylon

13 mm,0.22 μm 100/pk

30040

FitMax針頭式過濾器 Nylon

13 mm,0.45 μm 100/pk

標(biāo)準(zhǔn)品

12-N-10855-5G

對(duì)硝基酚[100-02-7]

5 g

色譜柱及保護(hù)柱

86005

Leapsil C18

UHPLC/HPLC兼容反相色譜柱

100 x 2.1mm,2.7 μm

HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對(duì)試劑

50102

甲醇  HPLC級(jí)

4 L

50101

乙腈  HPLC級(jí)

4 L

50138

乙酸銨  HPLC級(jí)

100 g

通用色譜產(chǎn)品

52401B

瓶架/藍(lán)色(現(xiàn)貨)

50孔

52401A

瓶架/白色(現(xiàn)貨)

50孔

1034

樣品瓶(棕色/螺紋)

2 mL, 100/pk

1035

樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

100/pk

H80465

HPLC 進(jìn)樣針

25 μL

紅色產(chǎn)品貨號(hào)#30039、#30040、#1034、#1035*

 

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