理論分析：

規(guī)格：10mg、25mg、50mg 等

貨期：根據(jù)具體的產(chǎn)品而定

純度：95%+

用途：實驗用途，科學(xué)研發(fā)，可定制服務(wù)

儲存條件：干燥、避光，短期（數(shù)天至數(shù)周）在 0 - 4 C 或長期（數(shù)月至數(shù)年）-20 C。

注意事項：所有的試劑不可用于臨床，不可用于食用，人體。

產(chǎn)品應(yīng)用：

FITC-Phalloidin 是一種熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）試劑，常用于細(xì)胞生物學(xué)和組織學(xué)研究中，用于特異性標(biāo)記和檢測細(xì)胞內(nèi)的肌動蛋白絲（F-actin）。 

鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是一種從毒蘑菇中提取的環(huán)狀七肽毒素，具有親和力和特異性，能夠選擇性地結(jié)合肌動蛋白絲（F-actin），而不會與單體肌動蛋白（G-actin）結(jié)合。FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一種綠色熒光染料，通過化學(xué)鍵與鬼筆環(huán)肽結(jié)合后，可以用于熒光顯微鏡觀察。

細(xì)胞和組織染色：FITC-Phalloidin 可用于固定和透化的細(xì)胞或組織切片的熒光染色，用于觀察細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)。

細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究：通過標(biāo)記 F-actin，可以研究細(xì)胞的形態(tài)變化、細(xì)胞遷移和細(xì)胞分裂等過程。

定量分析：可以用于定量分析細(xì)胞內(nèi) F-actin 的含量。

包裝：

使用方法：

一、工作液準(zhǔn)備

1. 對于FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（300T）

本品以溶于甲醇的20µM儲存液形式提供，總量為300µl。按照100 nM的工作液濃度來換算，可制備總量為60 ml的工作液。建議收到產(chǎn)品后，根據(jù)單次使用量，對母液進行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。

開始實驗前，使用1×PBS緩沖液稀釋儲存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。

2. 對于FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（1mg

本品以凍干粉形式提供，分子量為1177.3，總量為1mg。可先用甲醇或者DMSO充分溶解配制成20~100µM的儲存液。如，加入8.494ml甲醇到1mg鬼筆環(huán)肽即得到100µM等量的儲存液，根據(jù)單次使用量，進行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。

開始實驗前，使用1×PBS緩沖液稀釋儲存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。

二、染色步驟

1. 細(xì)胞爬片生長24h，使其密度達到50%匯合度。

2. 吸掉培養(yǎng)液，37℃預(yù)熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細(xì)胞2次。

3. 使用溶于PBS的4%甲醛溶液進行細(xì)胞固定，室溫固定10min。

※ 注意：避免固定劑中含有甲醇成分，因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。

4. 室溫條件下，用PBS清洗細(xì)胞2~3次，每次10min。

5. 室溫條件下，用丙酮（≤-20℃）脫水或者用0.5% Triton X-100溶液透化處理5min。

6. 室溫條件下，用PBS清洗細(xì)胞2~3次，每次10min。

7. 取200µl配制好的 FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液，覆蓋住蓋玻片上的細(xì)胞，室溫避光孵育30min（通常情況下，4℃~37℃孵育皆可）。

注意：為了降低背景，可于FITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽工作液內(nèi)加入1% BSA；另外，孵育過程中為了避免溶液揮發(fā)，可將蓋玻片轉(zhuǎn)移到一個密封的容器內(nèi)。

8. 用PBS清洗蓋玻片3次，每次5min。

9. 使用200µl DAPI溶液（濃度：100 nM）對細(xì)胞核進行復(fù)染，約30s。

10. 用PBS清洗蓋玻片，然后倒置在已經(jīng)滴有一滴Fluoromount-GTM 水溶性封片劑的載玻片上。使用紙巾輕輕檫掉多余封片劑，然后用指甲油封片。此法制備的標(biāo)本玻片可置于4℃避光保存，通常6個月內(nèi)可繼續(xù)做F-actin染色分析。

※ 注意：也可以直接使用含有DAPI的抗熒光淬滅封片劑，合并步驟9）10），簡化步驟。

11. 熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察，選擇FITC激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=496/516nm）和DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=364/454nm）。

相關(guān)試劑產(chǎn)品：

AF488 Phalloidin

Cyanine7 Phalloidin

FITC-GW3965

Vari Fluor 680-Phalloidin

Fluorescein-PEG-DBCO

Phalloidin-f-HM-SiR

Vinylsulfone-PEG-fluorescein

VS-PEG-FITC

FITC-Transferrin

Fluorescent Transferrin

FITC-Ureidopropionic acid

FITC-hyodeoxycholic acid

FITC-labeled Drisapersen sodium

FITC-Ricin Toxin

Retinoic acid-PEG-FITC

Niacin-PEG-FITC

Fluorescein-PEG-Niacin

SPA-FITC

Vari Fluor 633-Phalloidin

AlexaFluor 488 Phalloidin 

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