Invitrogen Q32852 Qubit RNA HS Assay Kit:RNA 定量的得力工具
高選擇性熒光染料結(jié)合:試劑盒采用了具有高度選擇性的熒光染料 。這種染料僅在與 RNA 結(jié)合時才會發(fā)出強烈的熒光信號,而與 DNA、蛋白質(zhì)或游離核苷酸等幾乎不發(fā)生作用。當(dāng)熒光染料與 RNA 結(jié)合后,其熒光性質(zhì)會發(fā)生顯著變化,熒光強度大幅增強,即使樣本中 RNA 豐度極低,也能產(chǎn)生可被精確檢測的信號,確保了對 RNA 定量的準(zhǔn)確性和特異性。
基于標(biāo)準(zhǔn)曲線的精準(zhǔn)定量:使用試劑盒時,先利用提供的緩沖液對濃縮分析試劑進行稀釋,隨后加入樣本(可接受 1µL 到 20µL 間的任意體積) 。Qubit 熒光計會讀取樣本的熒光信號強度,并將其與試劑盒內(nèi)預(yù)稀釋 RNA 標(biāo)準(zhǔn)品建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行比對。通過這種方式,能夠精準(zhǔn)計算出樣本中 RNA 的濃度,整個過程通常僅需約 2 分鐘,大大提高了實驗效率。
良好的污染物耐受性:在實際實驗過程中,RNA 樣本常受到各種污染物的干擾,如鹽、溶劑、洗滌劑、游離核苷酸或蛋白質(zhì)等 。Qubit RNA HS Assay Kit 對這些常見污染物具有出色的耐受性,這些污染物的存在基本不會對 RNA 定量結(jié)果造成明顯影響,保證了在復(fù)雜樣本背景下也能獲得可靠的 RNA 濃度數(shù)據(jù)。
高靈敏度與準(zhǔn)確性:該試劑盒能夠精準(zhǔn)檢測低至 250 pg/µL 的 RNA 濃度 ,在低豐度 RNA 樣本定量方面表現(xiàn)。與傳統(tǒng)的紫外吸收法相比,其檢測靈敏度更高,能有效降低背景噪音,避免因背景干擾導(dǎo)致的定量誤差,為科研人員提供更準(zhǔn)確的 RNA 濃度信息。例如在研究微量細(xì)胞中的 RNA 表達時,該試劑盒能夠精準(zhǔn)定量低含量的 RNA,助力科研人員深入探索細(xì)胞內(nèi)的基因表達調(diào)控機制。
特異性強:試劑盒中的熒光染料對 RNA 具有高度特異性,能夠有效區(qū)分 RNA 與 DNA、蛋白質(zhì)及游離核苷酸 。在進行 RNA 定量時,不會因其他生物分子的存在而產(chǎn)生誤判,保證了實驗結(jié)果的可靠性。這對于需要準(zhǔn)確 RNA 定量的下游應(yīng)用,如制備高質(zhì)量的 cDNA 文庫用于基因表達分析、進行 RT-qPCR 檢測基因表達水平的變化等,具有重要意義。
操作簡便快捷:使用 Qubit RNA HS Assay Kit 進行 RNA 定量的操作流程非常簡單 。科研人員只需按照試劑盒說明書,依次完成試劑稀釋、樣本添加和熒光計讀數(shù)等步驟,即可快速獲得 RNA 濃度結(jié)果。無需復(fù)雜的樣品前處理或昂貴的專業(yè)設(shè)備,即使是實驗新手也能輕松上手,極大地提高了實驗效率,節(jié)省了時間和人力成本。
基礎(chǔ)分子生物學(xué)研究:在基礎(chǔ)分子生物學(xué)研究中,常需要對細(xì)胞或組織中的 RNA 進行定量 。Qubit RNA HS Assay Kit 可用于準(zhǔn)確測定 mRNA、miRNA 等各類 RNA 的含量,為研究基因轉(zhuǎn)錄、RNA 加工、RNA 穩(wěn)定性等生物學(xué)過程提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。例如在研究細(xì)胞分化過程中基因表達的動態(tài)變化時,通過該試劑盒對不同分化階段細(xì)胞的 RNA 進行定量,有助于揭示細(xì)胞分化的分子機制。
疾病診斷與研究:在疾病診斷和研究領(lǐng)域,RNA 定量對于疾病的早期診斷、病情監(jiān)測以及藥物研發(fā)等具有重要價值 。例如在腫瘤研究中,通過檢測腫瘤組織或血液中特定 RNA 標(biāo)志物的含量,可輔助腫瘤的早期診斷和預(yù)后評估;在病毒感染研究中,準(zhǔn)確測定病毒 RNA 的拷貝數(shù),有助于了解病毒的感染程度和復(fù)制情況,為抗病物的研發(fā)提供依據(jù)。Qubit RNA HS Assay Kit 能夠為這些研究提供可靠的 RNA 定量結(jié)果,推動疾病診斷與治療技術(shù)的發(fā)展。
生物技術(shù)與制藥:在生物技術(shù)和制藥行業(yè),RNA 定量是許多工藝過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié) 。如在 RNA 疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)過程中,需要對 RNA 的質(zhì)量和濃度進行嚴(yán)格把控,以確保疫苗的有效性和安全性。Qubit RNA HS Assay Kit 的高靈敏度和準(zhǔn)確性,能夠滿足 RNA 疫苗研發(fā)中對 RNA 定量的嚴(yán)格要求,助力新型疫苗的開發(fā)和生產(chǎn)。
樣本要求:試劑盒適用于多種來源的 RNA 樣本,包括細(xì)胞裂解物、組織勻漿、血清、血漿等 。但為確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,樣本應(yīng)盡可能保持完整,避免 RNA 降解。在樣本采集和處理過程中,需嚴(yán)格遵循相關(guān)操作規(guī)程,使用無 RNase 的耗材和試劑。若樣本中存在可能影響 RNA 定量的雜質(zhì),如過多的蛋白質(zhì)、多糖等,建議在使用試劑盒前進行適當(dāng)?shù)募兓幚怼?/span>
實驗操作流程:首先,根據(jù)實驗需求,使用試劑盒提供的稀釋緩沖液將濃縮分析試劑稀釋成工作液 。接著,取適量(1µL 到 20µL)的 RNA 樣本加入到稀釋好的工作液中,充分混合均勻。將混合后的樣品放入 Qubit 熒光計中,按照儀器操作指南啟動檢測程序,熒光計會自動讀取熒光信號并計算出 RNA 濃度。整個操作過程需在室溫下進行,且要注意避免樣品受到光照、污染等因素的影響。
存儲條件:為保證試劑盒的性能穩(wěn)定,Qubit RNA HS Assay Kit 應(yīng)存儲于 2 - 8°C 的環(huán)境中 。在使用過程中,要盡量減少試劑盒的反復(fù)凍融次數(shù),取用試劑后應(yīng)及時放回冰箱保存。同時,要注意試劑盒的有效期,在有效期內(nèi)使用,以確保實驗結(jié)果的可靠性。
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