什么是賽默飛 微孔板熒光檢測(cè)儀
Thermo Fisher Scientific(賽默飛)Fluoroskan 微孔板熒光檢測(cè)儀(貨號(hào):5200450)的詳細(xì)介紹,圍繞其結(jié)構(gòu)原理、核心參數(shù)、操作界面、應(yīng)用案例、功能擴(kuò)展與技術(shù)支持六大部分展開(kāi),全面呈現(xiàn)其在熒光定量分析中的應(yīng)用能力。文章嚴(yán)格避開(kāi)廣告性描述,著重還原其科學(xué)屬性與實(shí)際性能。
一、產(chǎn)品概覽
Fluoroskan 是賽默飛推出的一款微孔板熒光檢測(cè)設(shè)備,型號(hào)為 5200450,專(zhuān)門(mén)用于測(cè)定樣品的熒光強(qiáng)度。它配備穩(wěn)定的光源系統(tǒng)和高靈敏度檢測(cè)模塊,能夠適配96孔和384孔微孔板,支持熒光相關(guān)實(shí)驗(yàn)如:
核酸定量(如RNA/DNA濃度檢測(cè))
熒光標(biāo)記蛋白分析
細(xì)胞活性/毒性實(shí)驗(yàn)(如FDA、Calcein AM染料法)
酶聯(lián)熒光免疫分析(ELFIA)
報(bào)告基因檢測(cè)(如GFP、Luciferase)
Fluoroskan 的設(shè)計(jì)目標(biāo)是為實(shí)驗(yàn)室提供一種可靠、結(jié)構(gòu)緊湊的熒光定量解決方案,適用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞學(xué)等研究領(lǐng)域。
二、技術(shù)結(jié)構(gòu)與檢測(cè)原理
Fluoroskan 采用基于濾光片的光路系統(tǒng),結(jié)合高性能的光電倍增管(PMT)進(jìn)行檢測(cè),其基本檢測(cè)流程包括:
激發(fā)光源照射樣品:選定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光通過(guò)濾光片投射至樣本中。
熒光激發(fā)與發(fā)射:目標(biāo)分子受激發(fā)后發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光。
發(fā)射光收集:通過(guò)發(fā)射濾光片進(jìn)行波長(zhǎng)分離,排除雜散光。
光信號(hào)轉(zhuǎn)換:PMT對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行采集并轉(zhuǎn)化為電信號(hào),經(jīng)過(guò)處理后輸出讀數(shù)。
濾光片式系統(tǒng)相比單色器系統(tǒng)響應(yīng)速度更快,特別適用于多樣本、高重復(fù)率的檢測(cè)流程。
三、核心參數(shù)與配置說(shuō)明
以下是 Fluoroskan 5200450 的關(guān)鍵性能參數(shù),便于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參考:
參數(shù)類(lèi)別 | 數(shù)值或說(shuō)明 |
---|---|
檢測(cè)方式 | 熒光強(qiáng)度(Fluorescence Intensity) |
樣本容器 | 96孔和384孔微孔板 |
激發(fā)/發(fā)射濾光片槽位 | 各6個(gè),可自由組合 |
檢測(cè)靈敏度 | DNA檢測(cè)至<1 pg/well(依據(jù)染料與孔型) |
光源類(lèi)型 | 高強(qiáng)度氙燈 |
動(dòng)態(tài)范圍 | >6個(gè)數(shù)量級(jí) |
讀取速度 | 96孔全板小于20秒 |
溫控模塊 | 可選,環(huán)境至45°C,適用于溫控反應(yīng) |
搖板功能 | 支持三種模式:線性、軌道、雙向(時(shí)間與速率可調(diào)) |
軟件支持 | 配套 SkanIt 軟件,支持多用戶管理與方法庫(kù)建設(shè) |
接口方式 | USB 2.0,兼容Windows平臺(tái) |
儀器采用模塊化結(jié)構(gòu),可根據(jù)研究方向配置不同波長(zhǎng)濾光片(如485/530 nm、355/460 nm等)以適應(yīng)不同熒光染料。
四、操作系統(tǒng)與數(shù)據(jù)輸出
Fluoroskan 搭配 Thermo Fisher 自研的 SkanIt 軟件系統(tǒng),用于實(shí)驗(yàn)編程、運(yùn)行監(jiān)控和數(shù)據(jù)處理,具有以下特點(diǎn):
1. 可視化方法編輯
拖拽式模塊操作,可實(shí)現(xiàn)激發(fā)-讀取-搖板-延時(shí)等動(dòng)作的組合
支持預(yù)設(shè)或自定義實(shí)驗(yàn)?zāi)0?,如熒光?biāo)準(zhǔn)曲線、動(dòng)力學(xué)曲線等
2. 實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)監(jiān)控
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可觀察各孔熒光變化,支持動(dòng)態(tài)刷新
可生成熱圖、柱狀圖、熒光衰減曲線等多種可視化形式
3. 數(shù)據(jù)導(dǎo)出與統(tǒng)計(jì)分析
支持輸出為Excel、CSV、PDF等格式
可自動(dòng)進(jìn)行平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、背景扣除、回歸分析等基礎(chǔ)處理
4. 用戶權(quán)限管理
支持多用戶登錄與方法加密,符合部分實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系要求
五、典型應(yīng)用場(chǎng)景
Fluoroskan 適配多種常見(jiàn)熒光實(shí)驗(yàn)流程,以下列舉幾類(lèi)代表性應(yīng)用:
1. 熒光染料定量核酸分析
如使用 PicoGreen 染料進(jìn)行 DNA 定量時(shí),F(xiàn)luoroskan 可在較低樣本濃度下獲得清晰信號(hào),并通過(guò)軟件自動(dòng)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,輸出精確濃度數(shù)值。
2. 蛋白質(zhì)標(biāo)記檢測(cè)
在抗體或小分子標(biāo)記熒光素(如FITC、Alexa Fluor)后,F(xiàn)luoroskan 可用于分析其結(jié)合強(qiáng)度或動(dòng)力學(xué)過(guò)程,適用于ELISA替代或蛋白-配體相互作用研究。
3. 細(xì)胞活力與毒性評(píng)價(jià)
在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,常用如Calcein AM染料檢測(cè)活細(xì)胞熒光,或使用ROS熒光探針檢測(cè)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)。Fluoroskan 提供足夠時(shí)間分辨率進(jìn)行短時(shí)動(dòng)力學(xué)記錄。
4. 信號(hào)通路與基因報(bào)告系統(tǒng)研究
配合熒光報(bào)告基因如GFP、Luciferase等,F(xiàn)luoroskan 支持時(shí)間點(diǎn)采樣或連續(xù)監(jiān)控,適合用于藥物篩選、高通量通量測(cè)試平臺(tái)等場(chǎng)景。
六、功能擴(kuò)展與配套資源
為了滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,F(xiàn)luoroskan 提供以下擴(kuò)展功能與服務(wù):
1. 濾光片定制
用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)染料波長(zhǎng)定制或選購(gòu)激發(fā)/發(fā)射濾光片組合,如:
FITC類(lèi)染料(激發(fā)485 nm / 發(fā)射 530 nm)
DAPI類(lèi)染料(激發(fā) 360 nm / 發(fā)射 460 nm)
Cy5類(lèi)染料(激發(fā) 620 nm / 發(fā)射 670 nm)
2. 環(huán)境控制支持
適用于酶反應(yīng)、細(xì)胞反應(yīng)等需恒溫條件實(shí)驗(yàn),溫控模塊支持持續(xù)加熱至45°C,且溫度穩(wěn)定性良好。
3. 自動(dòng)化兼容性
Fluoroskan 可接入Thermo Fisher自動(dòng)化工作站平臺(tái),實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣、數(shù)據(jù)處理、報(bào)表生成等流程整合,支持大批量樣本檢測(cè)流程。
七、維護(hù)簡(jiǎn)要與服務(wù)支持
設(shè)備配有自校準(zhǔn)與異常診斷機(jī)制,在光源、濾光片或讀取頭狀態(tài)異常時(shí)將自動(dòng)提示。定期維護(hù)建議包括:
每周檢查濾光片與光路清潔狀況
每月查看激發(fā)/發(fā)射濾光片是否老化或污染
每半年進(jìn)行信號(hào)基線校準(zhǔn)(由軟件引導(dǎo)操作)
售后支持方面,Thermo Fisher 提供標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)保、遠(yuǎn)程診斷、技術(shù)培訓(xùn)與應(yīng)用指導(dǎo)服務(wù),適用于實(shí)驗(yàn)人員快速掌握儀器操作與故障排查技巧。
八、總結(jié)
Fluoroskan(5200450)以其緊湊結(jié)構(gòu)、靈活波長(zhǎng)組合、軟件集成度高等特點(diǎn),為熒光類(lèi)檢測(cè)提供了一種具備穩(wěn)定性與適應(yīng)性的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。它適用于需要靈敏熒光信號(hào)檢測(cè)的分子生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)應(yīng)用,從基礎(chǔ)科研到方法開(kāi)發(fā)均可使用。實(shí)驗(yàn)人員可依據(jù)自身應(yīng)用目標(biāo)進(jìn)行濾光片配置、程序設(shè)定及數(shù)據(jù)輸出方式的個(gè)性化調(diào)整,從而構(gòu)建符合實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景的檢測(cè)流程。
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