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酸溶血定性檢測(cè)試劑盒說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2025年03月28日 15:21  

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過RBC運(yùn)送氧氣,RBC同時(shí)還具有免疫功能。在貧血檢查中可通過蔗糖水溶血試驗(yàn)來檢測(cè)紅細(xì)胞膜的缺陷,尤其適用于檢測(cè)陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH),該癥為獲得性紅細(xì)胞膜缺陷引起的慢性血管內(nèi)溶血,常在睡眠時(shí)加重,可伴發(fā)性血紅蛋白尿和全血細(xì)胞減少。

 酸溶血定性檢測(cè)試劑盒是利用PNH紅細(xì)胞對(duì)補(bǔ)體敏感性增高,在酸化的血清中經(jīng)過37℃孵育,易溶血,血清經(jīng)過56℃加熱30min,使補(bǔ)體滅活,病人紅細(xì)胞不溶解,該試劑盒主要用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的紅細(xì)胞膜的缺陷,尤其用于鑒定陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。 

自備材料:

1、生理鹽水

2、與患者同血型的正常新鮮血液

3、水浴鍋

 

操作步驟(僅供參考):

1、制備脫纖維血清:取患者和與患者同血型的正常人靜脈血 5ml,慢慢注入含有3個(gè)潔凈玻璃珠的小容器中,立即輕輕的持續(xù)搖動(dòng),直至纖維蛋白出現(xiàn)并附著于玻璃珠上為止(一    般需要 10~15min)。轉(zhuǎn)移脫纖維血至潔凈離心管,低速離心,取上清待用,即為脫纖維血清。

2、制備50%紅細(xì)胞懸液:取脫纖維血清,經(jīng)生理鹽水洗滌3次,每次都應(yīng)顛倒、混勻、離心,盡量吸棄上清液,留下紅細(xì)胞沉淀,加入等體積 PNH NaCl Buffer 重新懸浮紅細(xì)

胞,即為50%紅細(xì)胞懸液。

3、取試管6支,按下表先加入同血型正常人新鮮血清0.5ml,其中 3、6兩支試管在 56℃

水浴30min,使補(bǔ)體滅活,其余4管置于室溫 30min。此后按下表順序操作。

加入物(ml)

待測(cè)管

對(duì)照管

試管號(hào)

1

2

3

4

5

6

正常人新鮮血清

0.5

0.5

0.5

0.5

正常人 56℃滅活血清

0.5

0.5

Acidic Buffer

0.05

0.05

0.05

0.05

50%患者紅細(xì)胞懸液

0.05

0.05

0.05

50%正常人紅細(xì)胞懸液

0.05

0.05

0.05

混勻,置于 37℃水浴中 1h(30min 時(shí)輕輕混勻一次),離心。

陽(yáng)性結(jié)果(溶血)

±

3+


注意:如果PNH 患者第3管(加正常人滅活血清管)溶血,則說明此溶血不依賴于補(bǔ)體,故不是PNH,可能是紅細(xì)胞有其他缺陷(如球形紅細(xì)胞增多癥),應(yīng)做進(jìn)一步鑒別。

參考區(qū)間:正常人無溶血。

注意事項(xiàng):

1、 所用器具必須潔凈干燥,以免溶血造成假陰性。

2、 血清酸化后應(yīng)注意密閉保存,盡快檢測(cè),避免CO2逸出導(dǎo)致血清酸度降低,影響溶血程度。

3、 如果患者多次輸血,其血液中的不正常細(xì)胞會(huì)相應(yīng)減少,可呈弱陽(yáng)性或陰性。出現(xiàn)這種情況應(yīng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間至 4~6h,再觀察溶血情況。

4、 該實(shí)驗(yàn)可作為PNH的過篩實(shí)驗(yàn),陰性可排除 PNH,陽(yáng)性應(yīng)做酸化溶血實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

 

有效期6個(gè)月有效。


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