人白細(xì)胞介素-8 ELISA試劑盒的檢測(cè)方法

來(lái)源：上海牧榮生物科技有限公司 2024年10月16日 13:19

人白細(xì)胞介素-8（IL-8）ELISA試劑盒的檢測(cè)方法通常包括以下步驟：

1.材料準(zhǔn)備

試劑盒組件：包括ELISA板、標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)抗體、酶標(biāo)記二抗、底物溶液、終止液等。

樣品：血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液。

設(shè)備：微孔板酶標(biāo)儀、移液器、離心機(jī)等。

2.樣品準(zhǔn)備

收集血清或血漿樣本，按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行稀釋?zhuān)ㄈ绻枰?nbsp;

3.標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備

按照試劑盒說(shuō)明書(shū)的指示，將標(biāo)準(zhǔn)品按照不同濃度稀釋?zhuān)⒃O(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

4.ELISA板的涂布

加樣：向每個(gè)孔中添加標(biāo)準(zhǔn)品、樣品和空白對(duì)照。通常每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣品重復(fù)2-3次。

孵育：在37°C孵育一定時(shí)間（一般為1-2小時(shí)，具體時(shí)間參照說(shuō)明書(shū)）。

5.洗滌

使用洗滌液洗滌ELISA板，去除未結(jié)合的物質(zhì)。通常需要洗滌3-5次。

6.添加檢測(cè)抗體

向每個(gè)孔中加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，孵育一定時(shí)間。

7.再次洗滌

進(jìn)行洗滌以去除未結(jié)合的抗體。

8.添加底物

向每個(gè)孔中加入底物溶液，通常在暗處孵育15-30分鐘，直至出現(xiàn)顯色。

9.終止反應(yīng)

添加終止液，停止底物反應(yīng)。

10.測(cè)量

使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)（通常為450nm）下讀取各孔的光密度（OD值）。

11.數(shù)據(jù)分析

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中IL-8的濃度。

注意事項(xiàng)

確保所有試劑和樣品在使用前充分混勻。

嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

做實(shí)驗(yàn)時(shí)盡量避免樣品的重復(fù)凍融，以免影響結(jié)果。

通過(guò)以上步驟，您可以測(cè)定樣品中人白細(xì)胞介素-8的濃度。

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