高效液相色譜法（英語：high performance liquid chromatography，縮寫 HPLC），又譯高效液相層析法，以前曾指高壓液相層析法是一種色譜分析技術(shù)，用來分離混合物，以確認(rèn)并量化各個(gè)成分的比例。它依賴泵加壓樣品以令其通過填充有吸附劑的壓力柱，導(dǎo)致樣品的各個(gè)成分因而分離。高效液相色譜法常用于生物化學(xué)和分析化學(xué)。

 高效液相層析儀根據(jù)各種各樣的化工互作用力來分離混合物。這種互作用力通常是分析物及分析管柱之間的一種非共價(jià)性質(zhì)。使用高效液相色譜時(shí)，液體待檢測(cè)物在不同的時(shí)間被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動(dòng)，由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào)，每個(gè)峰頂都代表一個(gè)另外化合物的種類，最后通過分析比對(duì)這些信號(hào)來判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。
    以液體為流動(dòng)相而設(shè)計(jì)的色譜分析儀器稱為液相色譜儀。采用高壓輸液泵，高效固定相和高壓靈敏檢測(cè)器等裝置的液相色譜儀成為高效液相色譜儀。高效液相色譜儀種類繁多，但不論何種類型的高效液相色譜儀，基本上都分為4個(gè)部分：高壓輸液裝置，進(jìn)樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)。

    高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中，常用于醫(yī)藥品、化學(xué)、環(huán)保、生命科學(xué)、與食品工業(yè)的研究上。
    高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相，可將液體混合物中的成份分離、成分定性及定量分析。適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。例如：可檢測(cè)分析食品中的三聚氰胺的含量。