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前言

國家市場監(jiān)督管理總局，國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布即將實施的食品中乙酰磺胺酸鉀的測定方法，該標準適用于乳及乳制品，冷凍飲品、水果制品、蔬菜制品、食用菌和藻類、豆類制品、堅果與籽類、糖果、糧食制品、焙烤食品、調味品、飲料、酒類、果凍中乙?；前匪徕浀臏y定。

本實驗參考標準《GB 5009.140-2023 食品安全國家標準 食品中乙?；前匪徕浀臏y定》，使用EZsep™AL-N固相萃取柱進行樣品凈化，高效液相色譜進行檢測，建立了一種對果汁中乙?；前匪徕浀姆治龇椒?。

1、實驗過程

1.1 儀器與試劑

LC-20AD液相色譜儀，島津企業(yè)管理（中國）有限公司；

MPREP-SPE08手動固相萃取裝置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學儀器廠；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

乙腈（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

硫酸銨（分析純），購自國藥集團化學試劑有限公司。

水中安賽蜜溶液標準物質，1000μg/mL，壇墨質檢科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取水中安賽蜜標準溶液0.1mL，用水稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的色素混標中間液。

分別移取10μg/mL的色素混標中間液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5用水稀釋至1.0mL容量瓶中，得到濃度分別為0.1、0.2、0.5、1、2、5μg/mL的標準工作溶液。

1.3 實驗部分

準確稱取果汁試樣5.0g，置于50mL具塞離心管中，先加入20mL水，渦旋1min,超聲提取20min，10000r/min離心5min，上清液轉移至50mL容量瓶中，再向離心管中加水20mL，混勻后超聲5min并離心。合并上清液,用水定容至刻度，混勻。準確吸取提取液5mL，作為待凈化液，待凈化。

將EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，分別以10mL乙腈、10mL水活化后，取待凈化液上樣，收集流出液。分別用2mL甲醇-乙腈-硫酸銨溶液(5+10+85)洗脫液洗滌固相萃取柱2次，收集流出液，合并3次流出液，并用洗脫液定容至10mL，混勻，用PTFE微孔濾膜過濾，高效液相色譜測定。

1.4 LC分析

色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；

流動相：A:0.02mol/L硫酸銨溶液 B:甲醇；

流速：1.0mL/min；

檢測波長：227nm；

進樣量：10μL。

表1 流動相梯度洗脫表

2、       實驗結果

表2 加標回收率結果

圖1 乙?；前匪徕洏藴噬V

圖2 樣品空白標準色譜

圖3 樣品加標色譜圖

3、結論

本次實驗使用EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司，對肉果汁中乙?；前匪徕涍M行測定，其加標回收率范圍在89.4%~100.3%之間，RSD為4.7%。準確性和精密度均滿足GB 5009.140-2023要求，且實驗方法穩(wěn)定、可靠。

4、參考文獻

[1] GB 5009.140-2023 食品安全國家標準 食品中乙酰磺胺酸鉀的測定