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利用單細(xì)胞電感耦合等離子體質(zhì)譜評估卵巢癌細(xì)胞對順鉑的攝入

閱讀:550      發(fā)布時間:2017-06-26
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在西方國家,順鉑,卡鉑和奧沙利鉑是使用廣泛的鉑類癌癥化療藥物。卡鉑的有效性是由于其可以與DNA結(jié)合從而導(dǎo)致DNA- 鉑(Pt)加合物的形成,但這也會造成DNA 的彎曲。因此在化療后細(xì)胞必須修復(fù)DNA損傷,否則DNA復(fù)制受阻會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。許多癌癥患者初對基于鉑類的治療比較敏感,但一段時間后,患者通常對順鉑治療表現(xiàn)出耐藥性,導(dǎo)致了癌癥的復(fù)發(fā)。順鉑耐藥性歸因于三種主要的分子機(jī)制:DNA 修復(fù)的加速,胞漿失活的加速和細(xì)胞攝取藥物能力的變化。其中,細(xì)胞攝取藥物能力的變化主要表現(xiàn)在細(xì)胞對順鉑的攝入能力降低或者順鉑轉(zhuǎn)運

的加速。細(xì)胞內(nèi)順鉑的攝入與腫瘤負(fù)荷相關(guān),也就是說腫瘤對順鉑反應(yīng)降低會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)順鉑的含量降低。所以,分析單個細(xì)胞水平對順鉑的攝入和分布對于評估治療的有效性具有非常重要的意義。過多順鉑進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)會增加DNA 損傷和細(xì)胞死亡的頻率。了解細(xì)胞對順鉑的攝入將能為新療法的開發(fā)提供參考,以提高腫瘤對順鉑的敏感性。傳統(tǒng)方法的缺陷在于鉑的濃度只反映整體細(xì)胞群內(nèi)的濃度而不是個體細(xì)胞內(nèi)的濃度。因此,順鉑攝入在個體細(xì)胞之間的分布和差異無法通過傳統(tǒng)方法體現(xiàn)。實際上,細(xì)胞對順鉑的攝入有可能根據(jù)個體有很大差異,但至今還沒有有效的方法來評估。本文介紹了一種全新的技術(shù),可對金屬在單一細(xì)胞水平上進(jìn)行定量:單細(xì)胞電感耦合等離子體質(zhì)譜 (SCICP-MS)。SC-ICP-MS 是以單顆粒電感耦合等離子體質(zhì)譜(SP-ICP-MS)技術(shù)為基礎(chǔ),后者能夠在溶液中對納米粒子進(jìn)行評估與定量。兩種技術(shù)都基于測量單個細(xì)胞(或單個納米顆粒)在進(jìn)入等離子體時產(chǎn)生的離散信號的原理。每個細(xì)胞中的金屬成分離子化,產(chǎn)生離子流,檢測器以每秒100000 數(shù)據(jù)點的速度快速對信號采集測量,從而使得單個細(xì)胞中的金屬含量能被定量到阿克(ag/ 每細(xì)胞的水平。相比測量細(xì)胞內(nèi)順鉑攝入的傳統(tǒng)方法,SC-ICP-MS 所得結(jié)果的信息量更加全面。

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