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前瞻2025版中國藥典 | 譜育科技中藥中馬兜鈴酸A檢測解決方案

閱讀：732 發(fā)布時間：2024-10-31
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2022年12月發(fā)布的《中國藥典（2025 年版）編制大綱》明確提出要重點(diǎn)研究建立基于中成藥中馬兜鈴酸不得檢出的檢測方法，由此中藥中馬兜鈴酸的檢測愈發(fā)成為行業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)。

馬兜鈴酸主要存在于馬兜鈴科的馬兜鈴屬和細(xì)辛屬植物中，具有腎毒性、致突變及致癌性，被列為I類致癌物。其中，馬兜鈴酸A的毒性強(qiáng)且廣泛存在于相關(guān)中藥材中。因此，建立有效的檢測方法，對加強(qiáng)含馬兜鈴酸A的中藥材及中成藥風(fēng)險評估，降低其對人體的危害有著重要作用。

檢測馬兜鈴酸的常用方法是高效液相色譜法（HPLC）和液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）法。HPLC 法通常適用于馬兜鈴酸成分含量相對高、干擾較少的中藥品種，而LC-MS/MS法具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高、不易受干擾等優(yōu)勢，是靈敏檢測中藥中馬兜鈴酸的有效方法。

實(shí)驗(yàn)儀器

EXPEC 5210 LC-MS/MS

樣品前處理

取馬兜鈴中藥材，粉碎機(jī)粉碎，50目過篩兩次，精密稱取0.2g，加70%甲醇20mL，超聲提取40 min，冷卻至室溫，用70%甲醇定容至25mL，精密吸取該溶液1mL，用50%甲醇稀釋并定容至25mL，精密吸取該溶液1mL，用50%甲醇稀釋并定容至 100mL，過 0.22μm 濾膜后，上機(jī)測定。

實(shí)驗(yàn)條件

LC條件：流動相A，1mM甲酸銨-0.05%甲酸水溶液；流動相B，甲醇；流速，0.3mL/min；色譜柱，BEH C18（2.1x100mm，1.7μm ）；進(jìn)樣量 10μL；梯度，流動相A，0-2min, 45%；6min, 20%；6.1-8min，45%。

MS條件：運(yùn)行模式ESI+，毛細(xì)管高壓 4 kV，去溶劑氣流量 10.0 L/min，反吹氣流量 0.8 L/min，去溶劑氣溫度 380 ℃，碰撞氣流量 0.45 mL/min，霧化氣流量 1.2 L/min。

方法檢測限和定量

配置 0.1 μg/L 濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，按照 S/N=10 和 S/N=3 計算定量限和檢出限，馬兜鈴酸檢測限為 0.0044 μg/L，定量限為 0.0149 μg/L。圖1為0.1 μg/L 馬兜鈴酸A的色譜圖。

圖1 0.1 μg/L 馬兜鈴酸A色譜圖

方法穩(wěn)定性

選擇3個不同濃度的馬兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)品，連續(xù) 6 針進(jìn)樣，考察方法穩(wěn)定性，結(jié)果見表1。

表1 中藥馬兜鈴樣品測定結(jié)果色譜圖

藥材樣品加標(biāo)回收率

在中藥馬兜鈴樣品加標(biāo)濃度分別為 1 μg/L、10 μg/L、50 μg/L，每個濃度平行測定 3 次，回收率測定結(jié)果分別為 86.7%，87.8% 和 98.2%。

馬兜鈴藥材樣品測定

中藥馬兜鈴樣品色譜圖和檢測結(jié)果分別見圖2和表2。

圖2 中藥馬兜鈴樣品色譜圖

表2 中藥馬兜鈴樣品測定結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本文使用聚光科技自主孵化子公司譜育科技的EXPEC 5210 LC-MS/MS建立了檢測中藥馬兜鈴中的馬兜鈴酸A的方法，方法檢測速度快、靈敏度高、穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確可靠，可用于進(jìn)行中藥中馬兜鈴酸A的檢測。

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