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敵菌靈是一種殺菌劑，常用于防治蔬菜灰霉病、、斑枯病、霜霉病、茭白胡麻葉斑病等，具有低毒、內(nèi)吸性、殺菌譜廣等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于糧食蔬菜等農(nóng)作物。

異菌脲是一種觸殺型殺菌劑，對(duì)葡萄孢屬、核盤菌屬、小核菌屬、鏈孢霉屬均具有較好抑菌活性，主要用于蔬菜灰霉病、番茄早疫病、蘋果斑點(diǎn)落葉病和輪紋病的防治。

我國在2014年發(fā)布的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥大殘留*》*中指出，黃瓜、番茄中敵菌靈的大殘留*值（MRL）均為10mg/kg，異菌脲的大殘留量（MRL）分別為2mg/kg和5kg/kg。

目前國內(nèi)對(duì)于敵菌靈和異菌脲農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)主要有氣相色譜法、液相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用法等，前處理方法主要有液液萃取、固相萃取和基質(zhì)分散固相萃取等。

一、實(shí)驗(yàn)儀器

液相色譜儀、氮吹儀、高速均質(zhì)機(jī)、電子天平、離心機(jī)、粉碎機(jī)。

二、試劑

敵菌靈、異菌脲農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品、甲醇、乙腈、丙酮、正己烷、氯化鈉

三、樣品預(yù)處理過程

1、 準(zhǔn)確稱取粉碎均勻的試樣25g（至0.01g）于250ml廣口瓶中；

2、加入50.0ml乙腈，均質(zhì)機(jī)高速均質(zhì)2min，全部倒入100ml聚丙烯（PP）塑料離心管中；

3、4000rpm離心5min，取上清液倒入預(yù)先稱取5g-7g氯化鈉的100ml聚丙烯（PP）塑料離心管中，蓋上塞子，劇烈震蕩1min，靜置30min，使乙腈相和水相充分分層。

4、從離心管中吸取10.0ml乙腈溶液至15ml玻璃樣品管中，置于氮吹儀80℃水浴氮吹蒸發(fā)至近干；

5、加入2.0ml正己烷漩渦混勻待凈化。

6、依次用5.0ml正己烷+丙酮（90+10）淋洗液和5.0ml正己烷預(yù)淋洗小柱，當(dāng)正己烷液面層到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即移入待凈化樣液，棄去上樣流出液，用5.0ml正己烷+丙酮（90+10）淋洗液清洗樣品管后淋洗小柱，并重復(fù)一次，用15ml玻璃樣品管接收洗脫液。

7、將盛有洗脫液樣品管置于氮吹儀上，水浴50℃氮吹蒸發(fā)至干，加入2.0ml甲醇漩渦混勻，過0.22μm有機(jī)微孔濾膜，上液相色譜測(cè)定。

四、工藝流程

粉碎→均質(zhì)→離心→提取有效成分→氮吹濃縮→漩渦混勻→固相萃取凈化→氮吹濃縮→漩渦混勻→過濾→上樣

五、色譜檢測(cè)

六、結(jié)論

建立了采用固相萃取—液相色譜法同時(shí)測(cè)定黃瓜、番茄中敵菌靈和異菌脲農(nóng)藥殘留量的方法，并優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件。

本實(shí)驗(yàn)敵菌靈和異菌脲兩種農(nóng)藥的添加回收率在82.5%-102.8%之間，RSD在2.95%-8.68%之間，精密度和準(zhǔn)確度都較高，操作簡單快捷、方法準(zhǔn)確可靠，使用本方法*可以滿足黃瓜、番茄中敵菌靈和異菌脲農(nóng)藥殘留量的日常監(jiān)測(cè)需求。

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