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產(chǎn)品特點(diǎn)

溶液配置：

u磷酸鹽緩沖液Ⅰ（洗脫液）：

將磷酸鹽緩沖包Ⅰ450 mL 純水溶解，用10 M 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至 7.5±0.2，定容至 500 mL，轉(zhuǎn)移至潔凈密封的試劑瓶中。

磷酸鹽緩沖液Ⅱ（提取液）：

將磷酸鹽緩沖包Ⅱ用 900mL 純水溶解，用磷酸溶液調(diào)節(jié) pH 至 7.5 ± 0.2，定容至1L，轉(zhuǎn)移至潔凈密封的試劑瓶中。

樣品提取：

牛奶：

稱取 5g 試樣于燒杯中，加標(biāo)后，加入適量磷酸鹽緩沖液Ⅱ提取，分次將樣品轉(zhuǎn)移至 25 mL 容量瓶，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ 定容至刻度，充分混勻后轉(zhuǎn)入離心管 5000 r/min 離心 15 min，取樣液待凈化。

嬰兒配方奶粉：

稱取 5g 試樣于燒杯中，加標(biāo)后，加入溫?zé)?( 溫度不超過 50 ℃ ) 的磷酸鹽緩沖液 Ⅱ，攪 拌使樣品溶解，冷卻至室溫，分次將樣品轉(zhuǎn)移至 50 mL 離心管中并用磷酸鹽緩沖液 Ⅱ 定容至刻度，充分混勻后轉(zhuǎn)入離心管中，取 40 mL 溶液在室溫條件下 5000 r/min 離心 15 min，取樣液待凈化。

柱容量驗(yàn)收：

上樣加標(biāo) 2 mg。

SPE 小柱操作：

肝素親和柱（SBEQ-CC65001，6 mL/30 pcs）

活化：5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ；

上樣：10 mL 上清液（1 d/2 s）；

淋洗：10 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ，排干；

洗脫：4.5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅰ，排干，收集全部洗脫液。磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至 5 mL 混合，過 0.22 μm 濾器后，進(jìn)樣，待HPLC/UV 檢測。

注意事項(xiàng)：

①上樣要注意控制流速，流速過快可能造成10%-15% 左右損失； 

② 進(jìn)樣前的針式濾器，推薦采用親水PVDF濾器、親水PTFE濾器及水相聚醚砜針式濾器進(jìn)行過濾，不推薦尼龍針式濾器，可能造成40%-60%的損失。

液相色譜：ACQUITY UPLC超高效液相色譜儀

a) 色譜柱：Athena C4液相色譜柱（LAEQ-461579，4.6*150 mm, 5 μm, 300 A, 含柱效液）；

b) 流速：1.0 mL/min

c) 流動(dòng)相：0.1%三_氟_乙_酸，乙腈梯度洗脫，詳情見下表。

表 1-1 梯度洗脫表

參照GB 5009.299-2024使用Poly-Sery 肝素親和柱進(jìn)行柱容量驗(yàn)證及牛奶基質(zhì)、嬰兒配方奶粉基質(zhì)乳鐵蛋白加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，可以看出，肝素親和柱的柱容量回收率超過 95%，且嬰配奶粉基質(zhì)回收率高于其他國產(chǎn)品牌， RSD 值小于 5%，平行性優(yōu)異，柱容量滿足國標(biāo)要求。說明 CNW 小柱具有優(yōu)異的性能。