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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10^5 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH3517 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：BH3517
產品規(guī)格：5×10^5
本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。
產品介紹
人毛乳頭細胞
人毛乳頭細胞分離自皮膚組織；毛乳頭是一個可誘導毛囊生長、調控毛囊發(fā)育和周期性生長的結構，由細胞外基質及成纖維細胞構成，幾乎整個被毛囊下部的上皮基質包繞。毛乳頭在毛囊的形態(tài)學發(fā)生和毛囊周期性生長調控中起主導作用。在毛囊的下端，毛發(fā)基質由上皮細胞組成，這些細胞被真皮鞘及真皮乳頭包裹，進入到不同的分化程序，形成外毛根鞘、內毛根鞘及毛干。體外培養(yǎng)毛乳頭細胞形態(tài)呈細長梭形，聚集、卷曲呈長條狀。
本公司生產的人毛乳頭細胞采用胰蛋白酶和膠原酶混合消化制備而來，細胞總量約為5×105cells，細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，細胞純度可達90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。培養(yǎng)基信息：
培養(yǎng)基內容：基礎培養(yǎng)基、FBS、Penicillin、Streptomycin等
為保證細胞體外培養(yǎng)最佳狀態(tài)我們推薦使用人毛乳頭細胞專用培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)人毛乳頭細胞專用培養(yǎng)基。
使用方法
在技術部標準操作流程下，人毛乳頭細胞可傳3-5代左右；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
一、客戶收到細胞操作如下
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)；
2. 觀察細胞生長情況，細胞密度低于80%時，貼壁細胞倒去瓶中培養(yǎng)液，留下8ml作用繼續(xù)培養(yǎng)；細胞密度大于80%時，即可進行傳代；
3. 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS洗滌3次；
4. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴2-3min左右；倒置顯微鏡下觀察細胞回縮變圓，透亮時即可終止消化，加入雙倍培養(yǎng)液輕輕吹打細胞使其變成單細胞懸液；
5. 收集細胞懸液至離心管內，1000rpm離心5min，觀察細胞沉淀；
6. 加入1ml的培養(yǎng)液，輕輕吹打成單細胞懸液，均勻分配至細胞培養(yǎng)瓶中，初次傳代建議按照1：2比例進行
7. 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的培養(yǎng)基。
二、細胞凍存管復蘇
1. 提前室溫預熱培養(yǎng)基，將水浴鍋調至37℃；
2. 在超凈工作臺內提前準備好15ml離心管，并加入5ml的培養(yǎng)基；
3. 將凍存管快速放入水浴鍋中，不斷晃動凍存管，直至管內冰塊全部融化
4. 然后快速取出，噴灑酒精，轉移至超凈工作臺；
5. 擰開凍存管螺紋蓋，用移液槍將細胞懸液輕輕吸出，轉移至含5ml培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
6. 離心結束后，觀察有無細胞沉淀，將上清棄去，加入1ml新鮮的培養(yǎng)基，用移液槍輕輕吹打成細胞懸液；將細胞懸液轉移至T25培養(yǎng)瓶中，T25培養(yǎng)瓶建議培養(yǎng)基加入量5-7ml，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分散均勻，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
三、細胞凍存
1. 凍存條件：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO或者無血清凍存液
2. 保存條件：液氮存儲
人毛乳頭細胞
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