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在這里，我們展示了使用Gibco™ CTS™ Dynabeads™ CD3/CD28磁珠可以使初始和早期記憶T細(xì)胞幾乎100%恢復(fù)。這種同時進(jìn)行T細(xì)胞分離和活化的一步法產(chǎn)生純凈而且均勻活化的T細(xì)胞。用CTS Dynabeads CD3/CD28擴(kuò)增的CD4+和CD8+ T細(xì)胞在第10天維持早期記憶表型并且具有增加的克隆多樣性。早期去除磁珠是可行的并且提高γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。CTS Dynabeads CD3/CD28磁珠可提供可靠的結(jié)果，已用于80多種臨床試驗(yàn)和商業(yè)T細(xì)胞藥物生產(chǎn)中。
在制造過程中(圖1)，從患者(或T細(xì)胞供體)收集外周血單核細(xì)胞(PBMC)并轉(zhuǎn)移至GMP廠房，其中T細(xì)胞在CTS DynabeadsCD3/CD28磁珠的存在下被分離和激活，通過病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)行基因工程改造以表達(dá)嵌合抗原受體(CAR)。將活化的T細(xì)胞在補(bǔ)充有Gibco™ CTS™免疫細(xì)胞血清替代物的Gibco™CTS™ OpTmizer™ T細(xì)胞擴(kuò)增無血清培養(yǎng)基(SFM)中擴(kuò)增一段時間，通常為7–10天，以達(dá)到治療相關(guān)數(shù)量。然后通過去除磁珠來收獲它們，并配制用于冷凍或過繼轉(zhuǎn)移。