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賽默飛CO?培養(yǎng)箱滅菌程序詳解
一、引言
CO?培養(yǎng)箱是現(xiàn)代生命科學(xué)研究中關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，主要用于細(xì)胞、組織以及微生物的體外培養(yǎng)。為了保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性與樣品的生物安全，控制污染是使用過(guò)程中必須面對(duì)的重要問(wèn)題。污染可能來(lái)源于空氣顆粒、水盤(pán)、操作失誤、培養(yǎng)容器滲漏或前一次實(shí)驗(yàn)殘留的微生物。
為應(yīng)對(duì)這些潛在風(fēng)險(xiǎn)，許多CO?培養(yǎng)箱廠商在產(chǎn)品中內(nèi)置自動(dòng)滅菌程序，賽默飛（Thermo Fisher Scientific）作為行業(yè)內(nèi)的重要廠商，其多款培養(yǎng)箱型號(hào)均集成了高溫自動(dòng)滅菌功能，便于用戶定期對(duì)箱體內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行滅菌消毒。
本文將詳細(xì)介紹賽默飛培養(yǎng)箱中典型的滅菌程序，主要以Heracell VIOS系列和Forma Steri-Cycle系列為代表，說(shuō)明其工作機(jī)制、執(zhí)行流程、安全注意事項(xiàng)與維護(hù)要點(diǎn)。
二、滅菌方式分類(lèi)
賽默飛培養(yǎng)箱常見(jiàn)的滅菌方式包括以下幾種：
1. 高溫濕熱滅菌（自動(dòng)）
多數(shù)中賽默飛培養(yǎng)箱（如Heracell VIOS、Steri-Cycle）內(nèi)置高溫濕熱滅菌程序，可將內(nèi)腔溫度提升至180°C或140°C并保持一定時(shí)間（通常為6~12小時(shí)），以達(dá)到滅菌效果。
該方式模擬實(shí)驗(yàn)室高壓滅菌鍋中的濕熱滅菌原理，適合殺滅細(xì)菌、真菌、芽孢等常見(jiàn)污染源。
2. 紫外線殺菌（部分型號(hào)）
個(gè)別型號(hào)（如早期Heracell 150i）配備UV紫外殺菌燈，用于水盤(pán)或空氣通道中短時(shí)間滅菌。該方式成本較低，但滅菌范圍有限，主要適用于抑制微生物滋生，而非清除污染。
3. 手動(dòng)化學(xué)滅菌（非自動(dòng)程序）
對(duì)于無(wú)自動(dòng)滅菌功能的培養(yǎng)箱，如Thermo 311、160i等，需用戶使用酒精、次氯酸鈉、過(guò)氧化氫蒸汽等消毒劑對(duì)內(nèi)腔進(jìn)行擦拭和噴灑，殺滅殘留微生物。這種方式操作簡(jiǎn)便，但對(duì)操作規(guī)范和人員經(jīng)驗(yàn)有一定依賴。
三、高溫自動(dòng)滅菌程序詳解（以Heracell VIOS為例）
1. 滅菌機(jī)制
Heracell VIOS系列培養(yǎng)箱采用高溫空氣對(duì)流滅菌技術(shù)，程序設(shè)定為在180°C ±5°C條件下連續(xù)運(yùn)行6小時(shí)，滅菌期間系統(tǒng)將自動(dòng)關(guān)閉所有傳感器與氣體供應(yīng)，由程序接管控制。
滅菌對(duì)象包括：
內(nèi)膽結(jié)構(gòu)
擱板、支架
門(mén)封膠條（耐高溫硅膠材質(zhì)）
HEPA空氣過(guò)濾模塊（耐熱結(jié)構(gòu)）
風(fēng)扇系統(tǒng)（高溫兼容）
此類(lèi)滅菌程序已通過(guò)驗(yàn)證，滿足實(shí)驗(yàn)室微生物清除標(biāo)準(zhǔn)（如EN 285、ISO 17665）。
2. 程序啟動(dòng)條件
內(nèi)部清空：所有培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、液體容器必須移出。
附件拆卸：如CO?檢測(cè)管、外接探頭等敏感配件需斷開(kāi)或保護(hù)。
門(mén)封檢查：檢查門(mén)封是否貼合，防止高溫泄漏。
電源穩(wěn)定：滅菌程序全程需穩(wěn)定供電，不可中斷。
3. 操作步驟
以下以Heracell VIOS 160i為例：
進(jìn)入系統(tǒng)設(shè)置
從主菜單選擇“Sterilization"功能。
系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)檢查當(dāng)前狀態(tài)是否符合滅菌要求（溫度、門(mén)狀態(tài)、內(nèi)部負(fù)載等）。
確認(rèn)操作
屏幕提示確認(rèn)是否開(kāi)始滅菌。
用戶需輸入管理員密碼（如已設(shè)定），確認(rèn)執(zhí)行操作。
滅菌過(guò)程
升溫階段（1.5小時(shí)）：溫度逐步提升至180°C。
保溫階段（6小時(shí)）：維持180°C恒溫滅菌。
冷卻階段（3小時(shí)以上）：系統(tǒng)自動(dòng)降低至安全開(kāi)啟溫度。
結(jié)束提示
滅菌完成后，設(shè)備提示“Cycle Complete"。
系統(tǒng)記錄本次滅菌日志，可通過(guò)屏幕或數(shù)據(jù)接口導(dǎo)出。
重新配置
恢復(fù)CO?連接。
安裝內(nèi)部附件。
運(yùn)行空載測(cè)試，確認(rèn)溫度與氣體控制功能恢復(fù)正常。
4. 滅菌周期建議
常規(guī)實(shí)驗(yàn)室使用：每1-2個(gè)月執(zhí)行一次。
出現(xiàn)污染事件后：立即執(zhí)行1次滅菌。
長(zhǎng)時(shí)間停機(jī)后重新使用前：建議先運(yùn)行1次滅菌。
四、安全注意事項(xiàng)
高溫自動(dòng)滅菌雖操作便利，但仍需注意以下幾點(diǎn)：
1. 避免人員接觸設(shè)備表面
滅菌運(yùn)行期間設(shè)備外殼溫度可能升高，操作人員應(yīng)遠(yuǎn)離，避免燙傷。
2. 嚴(yán)禁夾帶液體或塑料器皿滅菌
非耐熱器具在高溫下可能融化或爆裂，導(dǎo)致污染或設(shè)備損壞。
3. 滅菌完成前不得強(qiáng)行斷電或開(kāi)門(mén)
中途干預(yù)可能導(dǎo)致滅菌失敗、系統(tǒng)損壞或熱氣泄露傷人。
4. 不得高頻率運(yùn)行滅菌程序
連續(xù)滅菌會(huì)加速電子元件老化，建議間隔至少兩周以上。
五、常見(jiàn)問(wèn)題與解決建議
| 問(wèn)題描述 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 滅菌程序啟動(dòng)失敗 | 內(nèi)部殘留樣品、門(mén)未關(guān)閉 | 清空腔體，重新確認(rèn)門(mén)狀態(tài) |
| 滅菌后設(shè)備不供氣或報(bào)警 | 系統(tǒng)未恢復(fù)CO?供氣模式 | 手動(dòng)切換至“運(yùn)行模式" |
| 門(mén)封變形或密封不良 | 多次高溫滅菌導(dǎo)致老化 | 更換耐高溫門(mén)封 |
| 滅菌完成后顯示溫度未恢復(fù) | 室溫過(guò)高或風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)不良 | 延長(zhǎng)冷卻時(shí)間，檢查風(fēng)扇狀態(tài) |
| 滅菌日志無(wú)法導(dǎo)出 | USB接口未識(shí)別或文件格式不兼容 | 更換存儲(chǔ)設(shè)備或咨詢廠商支持 |
六、無(wú)自動(dòng)滅菌功能型號(hào)的消毒建議
如Thermo 311、160i等型號(hào)無(wú)內(nèi)置滅菌程序，可參考以下人工滅菌流程：
1. 物理清潔
用70%乙醇擦拭腔體、擱架、門(mén)封等部位。
清洗水盤(pán)并高溫高壓滅菌（或使用消毒液浸泡）。
2. 化學(xué)消毒
使用0.5%-1%次氯酸鈉溶液擦拭后靜置15分鐘，再用清水擦干。
使用3%過(guò)氧化氫噴灑后關(guān)閉門(mén)30分鐘。
3. 紫外輔助
如有條件，可用便攜式UV燈對(duì)內(nèi)腔照射15分鐘以上。
七、維護(hù)與記錄建議
為了保持培養(yǎng)箱在長(zhǎng)期運(yùn)行中的潔凈性與穩(wěn)定性，推薦建立滅菌與維護(hù)記錄：
| 日期 | 滅菌方式 | 責(zé)任人 | 效果備注 |
|---|---|---|---|
| 2025-05-01 | 自動(dòng)高溫180℃ | 張三 | 無(wú)異常，運(yùn)行正常 |
| 2025-03-20 | 手動(dòng)化學(xué)消毒 | 李四 | 略有霉點(diǎn)已清除 |
建議張貼“滅菌記錄表"于設(shè)備側(cè)面或?qū)嶒?yàn)記錄本中。
若用于臨床或GMP要求環(huán)境，應(yīng)配合SOP文檔執(zhí)行。
八、總結(jié)
賽默飛培養(yǎng)箱配備的自動(dòng)高溫滅菌程序是提升實(shí)驗(yàn)潔凈度、降低污染風(fēng)險(xiǎn)的重要工具。通過(guò)高溫對(duì)整腔系統(tǒng)進(jìn)行定期殺菌，可減少微生物殘留，提高培養(yǎng)環(huán)境的可控性，尤其適合對(duì)細(xì)胞活性要求較高的科研項(xiàng)目。操作過(guò)程中需嚴(yán)格遵守程序與安全指引，避免誤操作帶來(lái)的設(shè)備損壞與人身傷害。
對(duì)于不具備自動(dòng)滅菌功能的機(jī)型，也可通過(guò)科學(xué)的化學(xué)消毒手段結(jié)合日常維護(hù)，維持培養(yǎng)箱的清潔狀態(tài)。
