中級會員·2年
提 供 商
資料大小
資料類型
資料圖片
下載次數(shù)
瀏覽次數(shù)LightCycler 480 II 實時熒光定量PCR儀（Roche Diagnostics）
一、設備概述
LightCycler 480 II 是 Roche Diagnostics 研發(fā)的一款高通量、全自動實時熒光定量PCR（qPCR）儀器。該設備采用創(chuàng)新的熱循環(huán)技術，結合先進的熒光檢測系統(tǒng)，能夠顯著提高實驗效率，同時確保高精度和高重復性的檢測結果。LightCycler 480 II 適用于基因表達分析、基因分型、突變檢測、病原體檢測等多種應用，特別適合需要高精度定量和大規(guī)模實驗的研究需求。
二、主要特點
1. 高通量支持
LightCycler 480 II 支持 96 孔板和384 孔板兩種格式，滿足不同實驗通量的需求。高通量能力使其特別適用于大規(guī)?；蚝Y選和臨床樣本檢測。
2. 創(chuàng)新的熱循環(huán)技術
該設備采用高效的銀合金模塊，確保熱傳遞的均勻性和快速升降溫能力。溫度均勻性對于PCR反應的準確性至關重要，LightCycler 480 II 通過優(yōu)化熱循環(huán)系統(tǒng)，確保實驗的高精度和重復性。
3. 多通道熒光檢測
LightCycler 480 II 具備 5 個熒光檢測通道，能夠同時檢測多種熒光染料，包括 SYBR Green、TaqMan 探針等。其靈敏的光學系統(tǒng)能夠高效檢測熒光信號，使得多重PCR（Multiplex PCR）成為可能，大幅提高實驗效率。
4. 精確的定量分析
LightCycler 480 II 能夠進行絕對定量、相對定量、基因分型、溶解曲線分析等實驗，適用于多種研究領域。其強大的數(shù)據(jù)分析軟件支持標準曲線法、ΔΔCt 法等不同定量分析方法，確保數(shù)據(jù)的可靠性。
5. 直觀的軟件界面
配套的 LightCycler 軟件提供直觀的操作界面，可實現(xiàn)實時數(shù)據(jù)采集、擴增曲線分析、基因分型等功能。該軟件還能自動生成實驗報告，簡化數(shù)據(jù)管理流程。
6. 適應不同的實驗需求
LightCycler 480 II 兼容多種熒光探針、染料和 PCR 反應體系，能夠靈活適應不同的實驗需求，如：
基因表達分析
基因分型
突變檢測
病原體檢測
藥物篩選
三、應用領域
1. 基因表達分析
LightCycler 480 II 通過實時熒光檢測，精準量化基因表達水平，適用于研究細胞信號通路、疾病機制及藥物作用。
2. 基因分型
該設備可用于 SNP（單核苷酸多態(tài)性）檢測和等位基因分型，廣泛應用于遺傳學研究和個性化醫(yī)學領域。
3. 突變檢測
可用于檢測腫瘤相關基因突變、病毒變異株等。高靈敏度的熒光檢測系統(tǒng)確保微量突變的準確識別。
4. 病原體檢測
LightCycler 480 II 可用于檢測病毒、細菌和其他病原微生物，特別適用于臨床診斷和公共衛(wèi)生監(jiān)測。
5. 藥物篩選
可用于篩選影響基因表達的候選藥物，評估藥物的作用機制。
四、操作流程
樣本準備
提取 DNA/RNA
進行逆轉錄（如 RNA 需要轉錄為 cDNA）
PCR 反應體系配置
添加 PCR 反應緩沖液、熒光探針/染料、酶、引物等
配置標準曲線（如需要）
裝載樣本
使用 96 孔或 384 孔 PCR 板
進行密封，防止蒸發(fā)
設置 PCR 程序
配置擴增步驟，如變性、退火、延伸等
選擇檢測通道和數(shù)據(jù)采集模式
運行 PCR 反應
啟動 LightCycler 480 II
實時監(jiān)測熒光信號，記錄擴增曲線
數(shù)據(jù)分析
生成擴增曲線、標準曲線、Ct 值分析等
輸出實驗報告
五、維護與保養(yǎng)
為了保持 LightCycler 480 II 的最佳性能，建議定期進行以下維護：
清潔光學組件
使用適當?shù)那鍧嵢軇┎潦脵z測模塊，避免灰塵影響熒光檢測。
溫控系統(tǒng)校準
定期進行溫度均一性測試，確保加熱模塊工作正常。
軟件升級
確保 LightCycler 軟件版本最新，以獲得最新的數(shù)據(jù)分析功能。
日常檢查
運行空白實驗，確保儀器沒有背景熒光污染。
六、技術參數(shù)一覽
| 參數(shù) | 規(guī)格 |
|---|---|
| 適用板型 | 96 孔、384 孔 |
| 熒光檢測通道 | 5 個通道 |
| 兼容熒光染料 | SYBR Green、TaqMan 探針、FAM、HEX、ROX、Cy5 |
| 溫度均勻性 | ± 0.1°C |
| 反應體積 | 10 - 100 µL（96 孔）；5 - 20 µL（384 孔） |
| 數(shù)據(jù)分析 | 絕對定量、相對定量、基因分型、溶解曲線 |
| 軟件 | LightCycler 軟件 |
| 通量 | 高通量支持 |
七、總結
LightCycler 480 II 是一款高通量、高精度的實時熒光定量 PCR 儀器，特別適用于需要進行大規(guī)模樣本分析的實驗室。其先進的熱循環(huán)技術、靈敏的熒光檢測系統(tǒng)和直觀的軟件操作界面，使其成為分子生物學研究、臨床診斷和藥物篩選等領域的重要工具。無論是基因表達分析、基因分型，還是病原體檢測，LightCycler 480 II 都能提供可靠的實驗結果，為科學研究和醫(yī)療應用提供有力支持
