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血漿二次復(fù)凍還能用嗎？
【標(biāo)本收集注意事項(xiàng)】
1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2.血清和血漿避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。
3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
4.標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測，需按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融。
5.可根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù)) 。
6.收集標(biāo)本，盡量做到雙份的用量，避免一次實(shí)驗(yàn)失敗，重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本缺失，從而耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
7.收集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)該做好防護(hù)措施（比如戴手套，口罩，護(hù)目鏡等），認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險(xiǎn)性。
8.樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面，并且正確使用生物安全柜。
樣本正確的處理方法應(yīng)該是這樣的：
【標(biāo)本處理辦法】
1.血清：將采集的全血靜置冰箱4℃過夜，然后1000-3000rpm離心10分鐘，取上清立即測試，暫時(shí)不測可以放入-20℃（1-3個(gè)月）或-80℃（3-6個(gè)月）保存。
2.血漿：用EDTA，枸櫞酸鈉，肝素等作為抗凝劑，加入血液混勻后，1000-3000rpm離
心10分鐘，取上清立即測試，暫時(shí)不測可以放入-20℃（1-3個(gè)月）或-80℃（3-6個(gè)月）
保存。
3.組織勻漿：切取組織塊，0.01MPBS中過洗一次；按照1G組織加入5-10ml組織蛋白萃取試劑的比例，在冰水中勻漿。勻漿完成后，5000-10000rpm離心10分鐘，取上清立即測試，暫時(shí)不測可以放入-20℃（1-3個(gè)月）或-80℃（3-6個(gè)月）保存。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：1000-3000rpm離心10分鐘，取上清立即測試，暫時(shí)不測可以放入-20℃（1-3個(gè)月）或-80℃（3-6個(gè)月）保存。
5.尿液，腹水，腦脊液等：1000-3000rpm離心10分鐘，取上清立即測試，暫時(shí)不測可以放入-20℃（1-3個(gè)月）或-80℃3-6個(gè)月）保存。
注：樣品稀釋的一般原則
上海繼譜的廣大客戶群體及其他用戶須查閱相關(guān)文獻(xiàn)了解標(biāo)本內(nèi)待測因子的含量，決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)，以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的zuijia檢測范圍。樣品的稀釋應(yīng)有詳細(xì)記錄。新鮮冰凍血漿(FFP)融化后在一定時(shí)間內(nèi)再次冰凍,血漿中各種成分的變化。方法將FFP37℃水浴融化后,測定血漿中各類凝血因子的活性、白蛋白(Alb)總蛋白(TP)含量和膽堿酯酶(CHE)活性;在12h內(nèi)將其冰凍,在7天后再次融化,測定Alb、TP、CHE和各種凝血因子的活性。結(jié)果FFP再次冷凍后,除活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)顯著變化外(P0.05),其余凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(Fbg)等凝血指標(biāo)均無明顯改變(P0.05),CHE和Alb、TP也無明顯改變(P0.05)。結(jié)論FFP融化后,如果12h內(nèi)未輸用,可以將其立即冰凍,給PT、Fbg、TT等。
