久久久久亚洲精品男人的天堂,日本韩国男男作爱GAYWWW,特黄AAAAAAA片免费视频,av天堂电影网

您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

13011300176

technology

首頁   >>   技術(shù)文章   >>   PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的嵌合體是什么?

天津益元利康生物科技有限...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)

PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的嵌合體是什么?

閱讀:698      發(fā)布時間:2024-11-18
分享:

PCR實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的嵌合體你知道是什么呢?它怎么產(chǎn)生的呢?那又如何預(yù)防和處理呢?這篇文章讓我們一起了解一下吧!


一、PCR嵌合體是什么


PCR嵌合體(Chimeric Products):PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的嵌合體是指一個PCR產(chǎn)物來自兩個或多個模板分子,通常是由于延伸未完quan導(dǎo)致的?。這種現(xiàn)象通常發(fā)生在PCR反應(yīng)中,特別是當(dāng)使用多重PCR或復(fù)雜模板時。嵌合體會導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物中含有非預(yù)期的片段,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,甚至導(dǎo)致錯誤的解釋。


二、形成原理

在PCR反應(yīng)中,DNA模板在高溫下解旋成單鏈,然后在低溫下引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對的原則結(jié)合。當(dāng)DNA聚合酶在延伸階段未能wanquan復(fù)制某個序列時,該部分序列在下一輪PCR反應(yīng)中作為引物繼續(xù)延伸,從而與其他序列混合,形成嵌合體序列?。具體來說,DNA聚合酶在擴(kuò)增某一片段時,可能會在模板鏈的某個位置發(fā)生“跳躍",將一個模板DNA片段與另一個模板片段拼接,從而生成嵌合體產(chǎn)物。嵌合體可以通過多種機(jī)制形成,但大多數(shù)嵌合體被認(rèn)為是由于擴(kuò)增不完整而引起的

常見的情況有以下三種:


模板DNA之間的重組

在PCR中,如果存在多個不同的模板DNA,它們的片段可能在擴(kuò)增過程中偶然地組合在一起。具


引物二聚體和擴(kuò)增錯誤

引物二聚體是引物分子自我結(jié)合形成的二聚體。如果PCR引物設(shè)計(jì)不當(dāng),或者引物濃度過高,可能會導(dǎo)致引物二聚體的產(chǎn)生,這些二聚體可能會參與擴(kuò)增過程,導(dǎo)致非特異性的擴(kuò)增。在某些情況下,DNA聚合酶在復(fù)制錯誤的引物二聚體或非特異性產(chǎn)物時,也可能會形成嵌合體。


DNA聚合酶的"跳躍"現(xiàn)象

DNA聚合酶在延伸過程中,有時會發(fā)生“跳躍"或“滑移",從一個模板區(qū)域轉(zhuǎn)移到另一個模板區(qū)域,這種現(xiàn)象通常發(fā)生在復(fù)雜的、含有重復(fù)序列或相似序列的區(qū)域。例如,如果模板中存在相似的序列(常見的擴(kuò)增子測序),聚合酶可能會錯誤地“切換"到另一條模板鏈,導(dǎo)致不同片段的連接,從而產(chǎn)生嵌合體。


總結(jié):

通常在PCR過程中,大概有1%的幾率會出現(xiàn)嵌合體序列,而以在16S/18S/ITS 擴(kuò)增子測序的分析中,系統(tǒng)相似度很,當(dāng)擴(kuò)增相似序列時,嵌合體可達(dá)1%-20%,需要去除嵌合體序列。

嵌合體的比例與PCR循環(huán)數(shù)相關(guān),循環(huán)數(shù)越高,嵌合體比例越高。


三、
如何避免PCR嵌合體


  • 使用純凈、單一來源的模板,避免多重模板

  • 優(yōu)化引物設(shè)計(jì),確保引物特異性,避免引物二聚體產(chǎn)生

  • 降低PCR反應(yīng)溫度和優(yōu)化擴(kuò)增條件

  • 減少PCR循環(huán)次數(shù)

  • 使用高保真(High-Fidelity)DNA聚合酶

  • 使用有限的DNA模版量



、
如何檢測和處理嵌合體


怎么判斷你的PCR產(chǎn)物中有沒有嵌合體呢?可以使用以下方法進(jìn)行檢測:

凝膠電泳:通過凝膠電泳查看PCR產(chǎn)物的大小和模式,若出現(xiàn)多個不一致的條帶或意外的遷移模式,可能意味著嵌合體的存在。

測序:對PCR產(chǎn)物進(jìn)行DNA測序。通過對比測序結(jié)果與預(yù)期的目標(biāo)序列,可以檢測到嵌合體的存在,并分析嵌合體的組成。

限制性酶切分析:如果知道嵌合體的可能位置,可以使用限制性內(nèi)切酶切割PCR產(chǎn)物,分析切割結(jié)果是否符合預(yù)期。(如需凝膠電泳產(chǎn)品,NEB PaqCI限制性內(nèi)切、測序試劑盒,請聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司)


PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的嵌合體是什么?







會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
又粗又黄又猛又爽大片app| 成全在线观看免费播放| 欧美日韩二区高清| 九月丁香婷婷亚洲综合色| 亚洲欧美日韩精品二区一二本| 成人午夜黄网站在线观看| 精品欧美一区二区在线观看| 中文字幕人妻无| 91不卡| 日本乱子人伦在线视频| 韩国漫画免费在线观看网站| 丰满少妇作爱视频免费观看| 男阳茎进女阳道啪啪| 一本大道一卡二大卡三卡免费| 久久成熟德兴若自然矣翻译| 四川少妇BBW搡BBBB槡BBBB| 亚洲爆乳无码中文字幕| 成人免费区一区二区三区| 日本欧美韩国在线观看| 日本三级欧美三级人妇视频黑白配| 欧美激情一区二区三区| 美女内射毛片在线看3D| 男阳茎进女阳道啪啪| 啦啦啦啦WWW日本高清| 欧美资源在线播放| 亚洲乱亚洲乱妇23p| 亚洲中国最大AV网站| 国产精品 欧美 亚洲 制服| 91精品亚洲一区| 免费午夜无码片在线观看影院| 黑人玩弄漂亮少妇高潮大叫| 放进去岳就不挣扎了| 中文字幕视频一区| 欧美亚洲色综久久精品国产 | 欧美日韩国产VA另类| 久久99免费视频| 天天做日日做天天添天天欢公交车 | 人人妻人人狠人人爽 | 被大肉榛征服的少妇| 少妇BBB搡BBBB搡BBBB| 性生潮久久久不久久久久|