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全式金Trans5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(CD201-02)現(xiàn)貨供應(yīng)

閱讀:2001      發(fā)布時間:2024-3-21
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全式金Trans5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(CD201-02)是經(jīng)過特殊工藝制作的細(xì)胞,適用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒DNA進(jìn)行測試時,轉(zhuǎn)化效率可高達(dá)每微克DNA超過108個轉(zhuǎn)化單位(cfu)。該菌株的基因型為F-φ80d lacZ△M15△(lacZYA-argF)U169 end Al recA1 hsdR17(rk-,mk+)supE44λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA。

全式金Trans5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(CD201-02)也適用于藍(lán)白斑篩選,其突變基因recA?和endA?有助于克隆DNA的穩(wěn)定性和高純度質(zhì)粒DNA的提取。這種細(xì)胞可以在-70℃保存六個月,但不適合在液氮中保存。請注意遵循適當(dāng)?shù)拇鎯l件以確保細(xì)胞的長期保存和使用質(zhì)量。

操作方法:

·取50 ml冰浴上融化的感受態(tài)細(xì)胞,加入目的DNA,輕輕混勻,在冰浴中放置30分鐘。

·42℃水浴熱激45秒,然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中2分鐘,該過程不要搖動離心管。

·向每個離心管中加入500μ無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃,200rpm培養(yǎng)1小時使細(xì)菌復(fù)蘇。

·根據(jù)實驗要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化),吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上,將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平板,37℃過夜培養(yǎng)。

注意事項:

· 避免反復(fù)凍融:盡量避免頻繁地凍融細(xì)胞。每次解凍后,盡可能立即進(jìn)行轉(zhuǎn)化實驗,而不是將其再次冷凍。

· 避免使用移液槍吹吸:在操作過程中,盡量避免使用移液槍進(jìn)行強力吸取和排放細(xì)胞。這樣可以減少對細(xì)胞的機械壓力和損傷。

· 輕柔操作:在整個操作過程中要注意輕柔處理細(xì)胞。避免過度搖動或震蕩細(xì)胞,以防止細(xì)胞破裂或損壞。

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規(guī)格

CD201-02

Trans5α Chemically Competent Cell

20×100 μl



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