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培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)有什么?

閱讀:1690      發(fā)布時間:2023-10-13
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培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,因此對于微生物檢驗(yàn)而言,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。那么培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)有什么呢?讓我們一起來看看吧!

一、配制要求

正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗(yàn)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時,要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明進(jìn)行配制,并做好配制記錄。在配制過程中,實(shí)驗(yàn)人員需要嚴(yán)格遵守相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn),佩戴口罩進(jìn)行操作,避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末,稱量、溶解應(yīng)使用專門的角匙,不使用金屬制品,避免金屬離子混入培養(yǎng)基,影響微生物生長;準(zhǔn)確稱量后,應(yīng)先加入適量的水充分溶解,再加水至所需量進(jìn)行加熱,加熱中應(yīng)不斷攪拌,防止培養(yǎng)基在容器底部積聚;調(diào)節(jié)pH值,分裝到比培養(yǎng)基體積最少大 20%的容器中,按說明要求進(jìn)行滅菌。粉末狀態(tài)的培養(yǎng)基開封后應(yīng)存放在陰涼干燥處,及時使用,環(huán)境濕度過大會使培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結(jié)塊、污染等情況。對于瓊脂類培養(yǎng)基,可采用沸水浴或流動蒸汽的加熱方式進(jìn)行融化,但反復(fù)凍融只允許進(jìn)行1次。

二、配制用水

水是配制培養(yǎng)基bu可或缺的一部分,一般使用純化水。還應(yīng)定期檢查培養(yǎng)基配制用水的微生物污染情況,應(yīng)符合純化水要求。

三、滅菌

滅菌能確保培養(yǎng)基質(zhì)量達(dá)標(biāo),實(shí)驗(yàn)室常采用濕熱滅菌法,培養(yǎng)基應(yīng)按照產(chǎn)品使用說明要求進(jìn)行滅菌,每次滅菌需放置壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡,驗(yàn)證滅菌效果。一些培養(yǎng)基可以通過煮沸的方式進(jìn)行滅菌,如結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基、亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)及時將培養(yǎng)基從滅菌鍋中取出,盡快冷卻至所需溫度,防止加熱過度,對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)造成影響;要檢查培養(yǎng)基的pH值、色澤、均勻度等指標(biāo),確保符合要求后貼上標(biāo)簽,標(biāo)明名稱、日期、效期等基本信息。

四、制備

制備平板時,將滅菌后的培養(yǎng)基傾注于滅菌過的干燥平皿中,在平皿中形成至少3mm的厚度,直徑90mm的平皿通常需要加入18~20mL 的瓊脂培養(yǎng)基,需要保存或培養(yǎng)超過48h的培養(yǎng)基應(yīng)傾注更多培養(yǎng)基 。培養(yǎng)基冷卻凝固后應(yīng)立即使用或儲存,儲存時應(yīng)標(biāo)記好培養(yǎng)基名稱及制備日期,密封后放置在2~8℃冰箱中。制備斜面培養(yǎng)基時,應(yīng)先將培養(yǎng)基分裝到試管中,通常每管加入10mL培養(yǎng)基,高壓滅菌,在培養(yǎng)基冷卻凝固前將試管傾斜一定角度放置,待冷卻凝固后方能使用和保存。對于液體培養(yǎng)基,根據(jù)使用要求直接分裝至三角瓶或試管中,滅菌,冷卻至室溫直接使用或保存。

五、培養(yǎng)基的儲存

驗(yàn)收入庫的培養(yǎng)基應(yīng)嚴(yán)格按照生產(chǎn)廠家標(biāo)明的儲存條件、保存期限、使用方法保存和使用。開封后的商品化脫水合成培養(yǎng)基要放置在密閉容器中保存,在瓶身注明shou次開封日期 。實(shí)驗(yàn)室自制培養(yǎng)基應(yīng)避光、干燥保存,需冷藏的培養(yǎng)基可放置在2~8℃冰箱中保存,平板保存時間通常為2~4 周,瓶裝及試管裝培養(yǎng)基保存時間一般為3~6個月,具體效期應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證。每次使用培養(yǎng)基前,要觀察顏色變化、流動性、均勻性、是否結(jié)塊和是否污染等情況。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結(jié)塊、其他性狀明顯改變的情況,應(yīng)停止使用。

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