在現(xiàn)代生物制藥的世界里，活性藥物成分（API）的制造就像烹飪大餐，上游工藝（USP）是食材準(zhǔn)備階段，下游工藝（DSP）就是大廚的烹飪過程。

先來看看上游工藝（USP）。我們精心挑選最好的“細(xì)胞種子”，進(jìn)行細(xì)致的發(fā)酵培養(yǎng)。這些細(xì)胞會(huì)在適合的條件下快樂成長，生產(chǎn)出所需的生物分子。這就是我們的原料，之后就由下游工藝（DSP）來完成精彩的烹飪過程。

下游工藝（DSP）就像是位大廚，他要做的就是將上游工藝（USP）提供的原料進(jìn)行精心的烹飪。細(xì)胞與溶液的分離就像是清理食材，去蕪存菁。然后根據(jù)電荷、大小、疏水性或親和力等特性，將所需的 API 從細(xì)胞中釋放出來。這個(gè)過程就像是將各種食材巧妙地融合在一起，形成一道美味的大餐。

整個(gè)過程就像廚師需要關(guān)注菜品的味道一樣，我們還需要密切監(jiān)測副產(chǎn)物、細(xì)胞生長培養(yǎng)基的特性以及后續(xù)純化和加工步驟中的產(chǎn)品質(zhì)量。同時(shí)還要監(jiān)測關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQAs）和關(guān)鍵工藝參數(shù)（CPPs），讓每一個(gè)步驟都完美無瑕。

因?yàn)樯锂a(chǎn)物是如此復(fù)雜，我們不能僅僅依靠經(jīng)驗(yàn)，還需要借助靈敏的分析工具（例如 UHPLC）來提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，幫助我們精確控制每一個(gè)步驟，確保一切都恰到好處。

在下游工藝中，我們巧妙地運(yùn)用在線 LC 來“把關(guān)”，監(jiān)測 mAb 純化工藝中高分子量聚集體的百分比（%HMWs mAb 聚集體），確保經(jīng)過 AEX 色譜精處理步驟的洗脫液的產(chǎn)品質(zhì)量。我們采用了符合 GMP 要求的無菌 FPLC 解決方案，而配備 NovaSeptum 取樣接頭的 Agilent 1260 Infinity II Prime 在線液相色譜系統(tǒng)，就像一個(gè)守門員，緊緊盯著來自純化系統(tǒng)的“出口”，完成以下動(dòng)作：

為了應(yīng)對(duì)可能出現(xiàn)的“色譜柱故障”，我們還準(zhǔn)備了一臺(tái)額外的泵和柱切換閥，像替補(bǔ)隊(duì)員一樣隨時(shí)待命。當(dāng)色譜柱“體力不支”時(shí)，它們可以立即“替補(bǔ)上場”，確保生產(chǎn)流程的順利進(jìn)行。

每 4 分鐘我們就能得到一份“體檢報(bào)告”，上面清楚地顯示了所需 mAb 的濃度和高分子量聚集體的百分比信息，用來輕松判斷產(chǎn)品的質(zhì)量是否符合預(yù)期。報(bào)告的關(guān)鍵信息通過 OPC UA 傳遞給上級(jí)過程控制系統(tǒng) PCS（工藝流程控制的大腦），由 PCS 來決定整個(gè)純化過程的節(jié)奏。4 分鐘一次的結(jié)果還可以繪成趨勢圖，一圖看清 HMW 聚集體的面積百分比變化過程（圖 3）。

在線監(jiān)測的結(jié)果顯示了以下的趨勢：

?在線液相色譜系統(tǒng)所生成的數(shù)據(jù)都可用于反饋循環(huán)。

在治療性 mAb 下游工藝中增加的在線液相監(jiān)測手段，能夠及時(shí)提供純化過程的關(guān)鍵數(shù)據(jù)，并實(shí)時(shí)反饋幫助決策，改善產(chǎn)品質(zhì)量并確保工藝可靠。

除此之外，在線液相（液質(zhì)）監(jiān)測還可以擴(kuò)展至上下游工藝的多個(gè)節(jié)點(diǎn)，支持不同監(jiān)測項(xiàng)目，并和其他在線手段結(jié)合，提高對(duì)工藝的理解和控制。