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如何恢復(fù)HPLC色譜柱性能？

閱讀：2023 發(fā)布時(shí)間：2021-9-15

　　大家都知道HPLC色譜柱的壽命是有限的，在使用過程中隨著時(shí)間的推移，其性能開始下降。你可以通過峰形和峰形之間的分離，柱背壓的不規(guī)律增加以及重影峰的出現(xiàn)來(lái)判斷HPLC色譜柱的性能出現(xiàn)了下降。色譜柱是昂貴的色譜耗材，平常使用完畢后需要保養(yǎng)。如果色譜柱真的發(fā)生了性能下降，有什么方法可以恢復(fù)呢?

　　首先，如果色譜柱由于過載或使用不兼容的流動(dòng)相而結(jié)垢，是可以恢復(fù)的，但已經(jīng)損壞的色譜柱或已經(jīng)過使用壽命的色譜柱無(wú)法恢復(fù)，需要更換。

色譜柱還原程序如下，供大家參考：

　　反相柱

　　反相分離是大多數(shù)HPLC分離中使用的主要操作模式。填料主要由C18，C4，CN，NH2和苯基固定相組成。建議以水-乙腈-異丙醇-庚烷-異丙醇-乙腈-流動(dòng)相的順序用10至20倍體積的溶劑洗脫

　　正相柱(氨基，二醇，硝基，氨基固定相)

　　用20倍體積的溶劑沖洗，按照庚烷-異丙醇-乙腈-水-異丙醇-庚烷的順序。

　　GPC / GFC色譜柱

　　用5倍體積且PH值為3的0.1%磷酸鹽緩沖液沖洗。如果使用了保留力強(qiáng)的蛋白質(zhì)，則使用從水到乙腈再到水的60分鐘梯度液沖洗。

　　色譜柱在使用前都要對(duì)其性能進(jìn)行考察，使用期間或放置一段時(shí)間后也要重新檢查，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。柱性能指標(biāo)包括在一定實(shí)驗(yàn)條件下(樣品、流動(dòng)相、流速、溫度)下的柱壓、理論塔板高度和塔板數(shù)、對(duì)稱因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性，或分離度。進(jìn)行柱效比較時(shí)，還要注意柱外效應(yīng)是否有變化。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是最佳條件)，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。

　　恒譜生色譜柱柱管由不銹鋼制成，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光，減小管壁效應(yīng)，提高柱效，柱中填充鍵合硅膠或聚合物填料。色譜柱基于高純硅膠，采用*鍵合技術(shù)，具有優(yōu)異的峰形，靈敏性好?；|(zhì)金屬含量低，對(duì)所有類型的分析物均表現(xiàn)完好峰形。機(jī)械強(qiáng)度高，穩(wěn)定性好，質(zhì)控嚴(yán)格，確保色譜柱性能和色譜柱的使用壽命。有多種尺寸規(guī)格可供選擇以適應(yīng)色譜工作者及其使用的不同需求。我們有專業(yè)的技術(shù)工程師團(tuán)隊(duì)為您的需求提供解決方案，歡迎前來(lái)咨詢了解！

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