氣相色譜(gas chromatography 簡(jiǎn)稱GC)是分離和鑒定低分子量氣體或揮發(fā)性液體的理想技術(shù)，它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國(guó)防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用。氣相色譜可分為氣固色譜和氣液色譜。高效液相色譜法的原理與氣相色譜法的原理相同。但是氣相色譜不適用于不揮發(fā)物質(zhì)和對(duì)熱不穩(wěn)定物質(zhì)，而液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，有些樣品因?yàn)殡y以汽化而不能通過(guò)柱子，熱不穩(wěn)定的物質(zhì)受熱會(huì)發(fā)生分解，也不適用于氣相色譜法。這使氣相色譜法的使用范圍受到了限制。
清楚了解這兩種分離技術(shù)之間的區(qū)別非常重要，以便您可以為所需的分離選擇最佳技術(shù)。本文重點(diǎn)介紹了這兩種技術(shù)之間的主要區(qū)別。
流動(dòng)相
HPLC中使用的流動(dòng)相是液體，而在氣相色譜法中則是氣體。由于液體的密度和粘度較高，因此要使用泵來(lái)給流動(dòng)相推動(dòng)壓力通過(guò)HPLC色譜柱，因此液相色譜的背壓通常很高，比如超高壓液相色譜。背壓太高會(huì)對(duì)液相系統(tǒng)造成負(fù)擔(dān)，因此適當(dāng)?shù)目刂圃诤线m的壓力程度，有助于我們分析測(cè)試的正常運(yùn)行。恒譜生的液相色譜柱、保護(hù)柱、在線過(guò)濾器等都能做到低背壓，死體積小，避免對(duì)分析結(jié)果造成影響。
分析物的性質(zhì)
在HPLC上分析的樣品通常不耐熱，并且在較高溫度下會(huì)降解，而在GC中，溶質(zhì)可承受高達(dá)400℃的溫度，并且具有揮發(fā)性。用于HPLC分析的樣品通常是液體或溶解在液體中的固體。除液體和溶解的固體外，GC還可以處理氣體。GC樣品的分子量較低，而HPLC可用于分析涵蓋從高分子量聚合物到大型生物分子的一系列樣品的高分子量化合物。
色譜柱大小
液相色譜 (HPLC) 柱的大小通常用其長(zhǎng)度和內(nèi)徑來(lái)表示。常見尺寸如下：
*長(zhǎng)度:通常為 10 到 30 厘米。較長(zhǎng)的色譜柱通常具有更高的分離效率，但也需要更長(zhǎng)的分析時(shí)間。
HPLC column length
*內(nèi)徑:通常為 2 到 5 毫米。較寬的色譜柱通常具有更大的樣品容量，但也可能降低分離效率。
HPLC column inner diameter
柱尺寸對(duì)分離的影響
色譜柱的尺寸對(duì)分離效果有重要影響，主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：
1. 分離效率: 柱長(zhǎng)和理論板數(shù)成正比關(guān)系，理論板數(shù)越高，分離效率越高。
2. 分析時(shí)間: 柱長(zhǎng)越長(zhǎng)，流動(dòng)相通過(guò)色譜柱的時(shí)間越長(zhǎng)，分析時(shí)間越長(zhǎng)。
3. 樣品容量: 色譜柱的內(nèi)徑越大，可以容納的樣品量越多。
4. 柱背壓: 柱長(zhǎng)和內(nèi)徑越小，柱背壓越低，對(duì)色譜柱和儀器的壓力越小。
選擇色譜柱尺寸
選擇色譜柱尺寸時(shí)，需要綜合考慮分離效率、分析時(shí)間、樣品容量、柱背壓等因素，并結(jié)合實(shí)際應(yīng)用需求進(jìn)行選擇。
常見HPLC色譜柱尺寸
以下是一些常見的HPLC色譜柱尺寸：
· 分析型色譜柱: 長(zhǎng)度為10-25厘米，內(nèi)徑為2-4.6毫米。適用于常規(guī)分析應(yīng)用。
· 制備型色譜柱: 長(zhǎng)度為25-50厘米，內(nèi)徑為7-10毫米。適用于樣品制備和純化。
· 毛細(xì)管色譜柱: 長(zhǎng)度為1-2米，內(nèi)徑為0.05-0.2毫米。適用于高分離度分析。
工作溫度
由于化合物的熱不穩(wěn)定特性，HPLC操作通常在環(huán)境溫度下進(jìn)行，比如操作時(shí)將液相色譜柱放入恒溫箱中使用。而氣相色譜柱操作的環(huán)境溫度并不苛刻。
工作壓力
由于液體具有較高的密度和粘度，因此對(duì)于常見的分析分離，需要在5000 – 6000 psi范圍內(nèi)的較高壓力。UHPLC系統(tǒng)能夠在15,000 – 18,000 psi的范圍內(nèi)運(yùn)行。GC色譜柱中的載氣要求在150 – 200 psi范圍內(nèi)的較低壓力即可。
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