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肽標(biāo)記策略

閱讀:808      發(fā)布時(shí)間:2024-3-20
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肽標(biāo)記策略 

標(biāo)記肽可以通過(guò)修飾分離的肽或在固相合成過(guò)程中結(jié)合標(biāo)記來(lái)制備。用熒光團(tuán)標(biāo)記肽的常用策略包括: 


  1. 肽合成過(guò)程中的標(biāo)記-可以耐受解封閉程序的染料可以結(jié)合到肽鏈的氨基末端。

   2.N端修飾:N端是指蛋白質(zhì)或多肽鏈起始處的游離胺基(-NH2)。可以使用胺反應(yīng)性琥珀酰亞胺酯熒光團(tuán)對(duì)其進(jìn)行共翻譯修飾或翻譯后修飾。 

   3.賴氨酸殘基:賴氨酸殘基的ε-氨基可以用胺反應(yīng)性琥珀酰亞胺酯熒光團(tuán)修飾。 

   4.C端修飾:C端是指蛋白質(zhì)或多肽鏈末端的羧基(-COOH)。它可以在翻譯后進(jìn)行修飾,通常是在C端酰胺化之后。 

   5.如果肽鏈上有半胱氨酸,巰基反應(yīng)蛋白標(biāo)記可以共價(jià)標(biāo)記合成肽。 

   6.非天然氨基酸可以在合成過(guò)程中結(jié)合到肽鏈中,然后通過(guò)生物正交反應(yīng)(例如基于疊氮化物和炔烴的反應(yīng)以及酮醛反應(yīng))用染料或其他探針標(biāo)記。

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