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calzyme凝乳酶簡述

閱讀:980      發(fā)布時間:2024-3-19
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calzyme凝乳酶  貨號:223A0020

凝乳酶是一種蛋白水解酶,主要存在于小牛的第四胃組織中,但也存在于其他一些反芻哺乳動物中。小牛第四胃(vells)的提取物既含有活性凝乳酶,也含有酶原凝乳酶,該酶原通過在4℃下暴露于pH 3.6中1至2天而被激活為凝乳酶(酶分析方法)。干酪中使用的vells粗提物被稱為凝乳酶,可以純化到相對容易獲得結(jié)晶凝乳酶的階段。

結(jié)晶腎素是一種異源蛋白,可通過色譜分離為兩種成分腎素A和腎素B .這兩種成分也可通過激活兩種不同的酶原獲得。

凝乳酶在pH 5.5至6.0之間穩(wěn)定,在pH 6.5以上相對不穩(wěn)定.它對血紅蛋白的最佳活性是在pH 3.7,在pH 4.9以上相對不活躍。氨基酸組成已被確定,這表明與胃蛋白酶有許多相似之處。凝乳酶的分子量為40,000,等電點(diǎn)為pH 4.5。

30℃時每分鐘凝固10毫升牛奶的凝乳酶量
  1. 底物:100毫升牛奶(或同等濃度的奶粉溶液)并加入1毫升氯化鈣(1.0摩爾/升)。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液。:用蒸餾水1:100稀釋凝乳酶。

  3. 酶溶液。:適當(dāng)稀釋,使凝固時間為標(biāo)準(zhǔn)凝乳酶的0.75至1.5倍

  1. 將水浴溫度設(shè)置為30℃

  2. 向50 ml試管中加入10 ml底物批次,并在30°C水浴中培養(yǎng)至少45分鐘。

  3. 在零點(diǎn)時,向底物管中加入1 ml稀釋的標(biāo)準(zhǔn)凝乳酶。在水浴中輕輕混合,使試管側(cè)面形成一層液體膜,并記錄凝結(jié)開始的時間(t1)。

  4. 重復(fù)步驟3。凝血時間應(yīng)在0至5秒內(nèi)一致。

  5. 使用酶溶液重復(fù)步驟3。記錄凝血時間(t2)。

  6. 如下所示計(jì)算活動。


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