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上海牧榮生物科技有限公司

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neuvitro纖連蛋白涂層方案

閱讀:1072      發(fā)布時間:2024-3-11
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Neuvitro公司提供專業(yè)涂層,覆蓋廣泛的基材,如PDL、PLL、PLO、膠原蛋白、明膠、層粘連蛋白、纖連蛋白、PDL+層粘連蛋白、PDL+纖連蛋白、PLO+層粘連蛋白、PLO+纖連蛋白、PDL +層粘連蛋白+纖連蛋白等。Electron Microscopy Science、ThermoFisher Scientific 和 VWR 提供的大多數(shù)帶涂層德國蓋玻片實際上是由 Neuvitro Corporation 制造的。

纖連蛋白是細胞外基質(zhì) (ECM) 的糖蛋白之一,可與跨膜受體和其他細胞外基質(zhì)成分(如膠原蛋白、纖維蛋白、多聚糖等)結(jié)合。纖連蛋白在細胞粘附、生長、遷移和分化中發(fā)揮重要作用。它對于其他過程也很重要,例如傷口愈合和胚胎發(fā)育。

Sigma 的纖連蛋白涂層方案

必須針對每種細胞系和應(yīng)用確定最佳貼壁條件。

  1. 用 0.5 mL 無菌水重新配制。不要攪動。讓溶液靜置 30 分鐘以溶解??赡軙埩羯倭课慈芙獾奈镔|(zhì)。這不會影響產(chǎn)品性能。

  2. 在無菌平衡鹽溶液中稀釋纖連蛋白,并以最小體積包被培養(yǎng)物表面。

  3. 在室溫下風干至少 45 分鐘。多余的纖連蛋白可以通過抽吸去除,但這不是必需的。

 

ABIF 的纖連蛋白涂層方案

  1. 庫存纖連蛋白(Sigma F-0895,來自人血漿的 1 mg/ml 纖連蛋白)應(yīng)分裝冷凍(-80oC),可在大約一個月內(nèi)使用。在冰箱中大約一個月后,蛋白質(zhì)會降解,細胞不再能很好地擴散。

  2. 對于 MEF 或 3T3 細胞,用 PBS++ 將 1mg/ml 纖連蛋白原液稀釋至 1 µg/ml;對于 CHO 細胞,稀釋至 2 µg/ml。 (1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS)

  3. 將 1 ml 纖連蛋白溶液放在玻璃底皿的蓋玻片上,并在冰箱中放置過夜。

  4. 用 PBS(含或不含鈣和鎂)沖洗 3 次,并置于冰箱中,兩周內(nèi)使用

Jacobs 的纖連蛋白涂層方案

程序

第 1 天(約 1 小時,等待 1 小時)

  1. 載玻片準備

  2. 將載玻片浸泡在 100% EtOH 中至少五分鐘(通常 20 分鐘是比較好的流動時間)。

  3. 在引擎蓋中打開 20 個培養(yǎng)皿。

  4. 將載玻片和乙醇放入通風柜中。

  5. 用同樣的 100% 乙醇對平頭鉗進行消毒。

  6. 將載玻片傾斜在培養(yǎng)皿邊緣晾干(面朝上)

  7. 將載玻片全部放下后翻轉(zhuǎn),以便另一面可以干燥,并且蓋子上聚集的任何乙醇都可以干燥。

  8. 一旦所有乙醇蒸發(fā)(載玻片上不應(yīng)有潮濕發(fā)亮的地方),將載玻片平放在培養(yǎng)皿底部。

  9. 將蓋子蓋在盤子上。

纖連蛋白溶液

  1. 每 1 mL PBS 溶液 (1:100) 制備 10 ul 纖連蛋白。每張載玻片需要 1 mL 的溶液。

    • 纖連蛋白溶液的體積 = [載玻片數(shù)量] x 1 ml/載玻片

  2. 4°C 下可保存長達 6 個月

  3. 對于 20 張載玻片,這意味著將 200 ul 纖連蛋白加入到 19.8 ml PBS 中。

  4. 攪拌均勻。

涂層

  1. 小心地將 1 ml 纖連蛋白溶液移至每個載玻片頂部。這是一個微妙的過程,要小心,慢慢來

  2. 不要讓溶液掉落到載玻片的邊緣。如果發(fā)生這種情況,您需要收集液體,對載玻片進行消毒,干燥并重試。任何從側(cè)面落下的液體都會將剩余的液體吸出并吸到載玻片下方,這是我們不希望的。

  3. 確保溶液覆蓋整個幻燈片。您可以使用無菌移液器吸頭將液體涂抹到任何裸露的點上。表面張力將使液體留在載玻片上,但不要將其推到側(cè)面。

  4. 蓋上玻片并讓玻片在細胞培養(yǎng)罩中于室溫下不受干擾地靜置 1 小時。

  5. 平板細胞

GG-12-fibronectin:直徑12毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $88.65

GG-12-1.5-fibronectin:直徑12毫米,#1.5厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡,每片密封15片袋子,已消毒,可立即使用 $98.65

GG-14-fibronectin:直徑14毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $93.65

GG-15-fibronectin:直徑15毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $98.65

GG-18-fibronectin:直徑18毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $113.65

GG-18-1.5-fibronectin:直徑18毫米,#1.5厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡,每片密封15片袋子,已消毒,可立即使用 $123.65

GG-20-fibronectin:直徑20毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $120.65

GG-22-fibronectin:直徑22毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $124.65

GG-22-1.5-fibronectin:直徑22毫米,#1.5厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡,每片密封15片袋子,已消毒,可立即使用 $134.65

GG-24-fibronectin:直徑24毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $134.65

GG-25-fibronectin:直徑25毫米,#1厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡,每袋密封15片,已滅菌,可立即使用 $144.65

GG-25-1.5-fibronectin:直徑25毫米,#1.5厚度,60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片,兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層,用于細胞培養(yǎng)和共聚焦熒光顯微鏡,每片密封15片袋子,已消毒,可供使用 $174.65


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