久久久久亚洲精品男人的天堂,日本韩国男男作爱GAYWWW,特黄AAAAAAA片免费视频,av天堂电影网

您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)

| 注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

17621170138

technology

首頁(yè)   >>   技術(shù)文章   >>   使用 PROTRAP 進(jìn)行自上而下的樣品制備

上海牧榮生物科技有限公司

立即詢(xún)價(jià)

您提交后,專(zhuān)屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)

使用 PROTRAP 進(jìn)行自上而下的樣品制備

閱讀:854      發(fā)布時(shí)間:2023-5-23
分享:

準(zhǔn)備注意事項(xiàng)
ProTrap XG 設(shè)備經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可處理 50 μg 蛋白質(zhì)。
對(duì)于可重現(xiàn)和最大的蛋白質(zhì)沉淀,沉淀過(guò)程中樣品中的最大SDS含量應(yīng)為1%。如果您的提取或裂解緩沖液含有超過(guò) 1% SDS,請(qǐng)使用最大離子強(qiáng)度為 300 mM 的緩沖液稀釋。
離心速度基于帶 24 x 1.5/2.0 mL 轉(zhuǎn)子的標(biāo)準(zhǔn)臺(tái)式微量離心機(jī)。
提供的時(shí)間僅供參考。
如果過(guò)濾濾芯中殘留的液體超過(guò)幾微升,請(qǐng)將其返回到離心機(jī)并重復(fù)旋轉(zhuǎn),或考慮提高旋轉(zhuǎn)速度。建議在后續(xù)旋轉(zhuǎn)中使用 3000 ×g (6000 rpm),ProTrap XG 已經(jīng)過(guò)高達(dá) 9000 ×g (10,000 rpm) 的測(cè)試。

所需材料
所有化學(xué)品和試劑應(yīng)為ACS級(jí)/HPLC級(jí)或更高。
丙酮
5 M 氯化鈉水溶液
80%甲酸水溶液(冷卻至–20°C)
冷凍水

自上而下的樣品制備方案

對(duì)于可重現(xiàn)和最大的蛋白質(zhì)沉淀,沉淀過(guò)程中樣品中的最大SDS含量應(yīng)為1%。如果您的提取或裂解緩沖液含有超過(guò) 1% SDS,請(qǐng)使用最大離子強(qiáng)度為 300 mM 的緩沖液稀釋。 為獲得最佳體驗(yàn),樣品應(yīng)至少含有 50 mM NaCl。 如果需要添加氯化鈉,請(qǐng)使用 5 M 氯化鈉溶液。

  • 不要讓過(guò)濾濾芯中的膜在步驟之間變干。

  • 將塞子擰到濾芯的底座上。 

  • 將 100 μL 稀釋的樣品蛋白轉(zhuǎn)移到堵塞的過(guò)濾柱中。

  • 加入 400 μL 室溫丙酮。

  • 蓋上過(guò)濾濾芯并輕輕搖晃,傾斜不超過(guò) 45°,以混合溶劑。 

  • 將過(guò)濾柱插入微量離心管中,等待 30 分鐘,使蛋白質(zhì)在室溫下聚集。

  • 連接塞子后,以 2500 × g (5000 rpm) 離心×2 分鐘。

  • 從微量離心管中取出過(guò)濾盒,倒置并擰下塞子。

  • 將帶蓋的過(guò)濾柱放回微量離心管中,并以 500 × (2000 rpm) 離心×3 分鐘。 丟棄通過(guò)溶劑的流量。 如果過(guò)濾濾芯中殘留任何溶劑,請(qǐng)以 3000 ×g (6000 rpm) 的速度重新旋轉(zhuǎn)裝置 2-5 分鐘。

  • 用 400 μL 丙酮清洗蛋白質(zhì)顆粒。立即以 500 × g (2000 rpm) × 2 分鐘離心。丟棄流過(guò)洗滌溶劑的流。

  • 更換插頭。在 –20°C 下將過(guò)濾筒中的沉淀物冷卻 10 分鐘。

  • 在水中加入 50 µL 冷 (-20°C) 80% 甲酸。蓋上濾芯,放入冰箱 10 分鐘,然后超聲處理 1 分鐘。

  • 加入 450 µL 冷凍水;蓋并渦旋以混合溶劑。

  • 完整的蛋白質(zhì)可以在干凈的微量離心管中直接回收,以 350 × g (2000 rpm) × 5 分鐘的速度離心。

如果需要進(jìn)一步的蛋白質(zhì)凈化,再溶解的蛋白質(zhì)也可以使用提供的可選 SPE 小柱和 SPE蛋白質(zhì)/肽凈化方案進(jìn)行 SPE 。


會(huì)員登錄

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
在線留言
99久久国产热无码精品免费| 久久性爱视频| 边做饭边被躁在线播放| 亚洲人午夜射精精品日韩| 精品国际久久久久999波多野| 竹菊影视一区二区三区| 日本亚洲色大成网站WWW| 亚洲精品免费在线视频| 亚洲午夜久久久久妓女影院| 精品久久久久久亚洲精品| 亚洲最大成人网 色香蕉| 在线视频一二三区2021不卡| 韩国理论片年轻的母亲全部| 无遮挡无码H纯肉动漫在线观看| 日韩欧美一区二区中文字幕| 中文字幕,人妻系列.| 门卫老头吮她的花蒂在线观看| 欧美人妻在线看| 可以看伦理片的网站| 久久99精品久久久久久婷婷| 欧洲肉欲K8播放毛片| 亚洲永久精品一区二区三区| 久久久久精品视频| 国内精品51视频在线观看| 高清国产MV视频在线观看| 国产特级毛片AAAAAA高潮流水 | 少妇扶着墙屁股撅起来| 日韩中文麻豆专区| (无码视频)在线观看| 国产 欧美 日韩在线视频| 日韩欧美电影在线观看| 少妇与黑人一二三区无码| 国产福利91精品一区| 亚洲欧美日韩高清中文在线| 最新系列国产专区|亚洲国产| 久久精品无码一区二区三区| 成人免费一区二区三区视频软件| 久久国产劲爆AV内射—百度| 亚洲深深色噜噜狠狠爱网站 | 国产高清在线精品一区不卡| 中国大陆女rapper18岁欢迎您免费|