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熒光濾光片的選型要點
熒光濾光片的選型要點：
1. 熒光染料匹配
激發(fā)波長：濾光片的中心波長需與染料的最大激發(fā)波長一致。
發(fā)射波長：濾光片的帶寬需覆蓋染料的發(fā)射光譜，同時避免與其他染料重疊。
案例：
FITC(異硫氰酸熒光素)：激發(fā)波長495 nm，發(fā)射波長519 nm。
激發(fā)濾光片：480/40 nm(中心波長480 nm，帶寬40 nm)。
發(fā)射濾光片：535/30 nm。
2. 系統(tǒng)兼容性
光路設(shè)計：
顯微鏡：需考慮物鏡數(shù)值孔徑(NA)和濾光片安裝方式(轉(zhuǎn)盤式、滑塊式)。
流式細胞儀：需與激光波長(如488 nm、633 nm)匹配。
尺寸與接口：
顯微鏡濾光片：直徑通常為25 mm或圓形(如φ25.4 mm)。
流式細胞儀濾光片：多為方形或定制尺寸。
3. 性能參數(shù)
透射率：優(yōu)質(zhì)濾光片透射率應(yīng)>90%(中心波長處)。
截止深度：OD>6可有效阻擋雜散光。
溫度穩(wěn)定性：高溫環(huán)境下(如激光照射)需選擇耐熱材料(如熔融石英)。