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82次以下是植物游離氨基酸(FAA)ELISA試劑盒的實驗使用說明書摘要:
BS-5067 植物游離氨基酸(FAA)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),通過抗體-抗原-酶標抗體復合物與顯色底物反應(yīng),顏色深淺與樣本中FAA濃度成正比。
二、試劑盒組成
預包被酶標板(48T/96T)
標準品(1-2管)及稀釋液(5-10mL)
酶標檢測抗體(60-120μL)及稀釋液
顯色液A/B、終止液
濃縮洗滌液(20-30倍)
三、樣本處理
血清/血漿?:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,避免溶血;
細胞上清?:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒物;
組織勻漿?:用生理鹽水勻漿后離心取上清;
建議分裝保存于-20℃,避免反復凍融。
四、操作步驟
標準品稀釋?:按濃度梯度稀釋(如40μmol/L→2.5μmol/L);
加樣?:
標準孔:50μL標準品
樣本孔:40μL稀釋液+10μL樣本(5倍稀釋);
孵育?:37℃溫育30分鐘;
洗滌?:用稀釋后的洗滌液洗板5次,每次靜置30秒;
顯色?:加顯色液A/B各50μL,37℃避光顯色15分鐘;
終止?:加50μL終止液,立即450nm測OD值。
五、注意事項
試劑使用前需平衡至室溫;
避免NaN3污染(抑制HRP活性);
顯色液需避光保存,終止液有腐蝕性;
不同批次試劑組分不可混用。
六、結(jié)果計算
以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,通過回歸方程計算樣本濃度。
以上資料僅供參考,如需完整說明書,建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取最新版本。
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