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小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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  天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

  以下是?小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒?的實驗使用說明書(綜合多品牌參數(shù)及操作要點):

  BS-2006  小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒

  一、試劑盒組成?

  組分 規(guī)格(96T/48T) 保存條件

  預(yù)包被微孔板 8×12 strips / 8×6 4℃干燥

  TGF-β2標準品 凍干粉(10,000pg/mL) 4℃(復(fù)溶后)

  檢測抗體(生物素標記) 120μL/70μL 4℃避光

  HRP標記鏈霉親和素 120μL/70μL 4℃避光

  TMB顯色液 10mL/6mL 4℃避光

  終止液(2M H?SO?) 10mL/6mL 室溫

  二、實驗前準備?

  樣本處理?

  血清/血漿?:采集后1000×g離心25分鐘,避免溶血或脂血。

  細胞上清?:離心去除顆粒,分裝保存于-80℃(避免反復(fù)凍融)。

  組織勻漿?:按重量體積比1:9加入PBS勻漿,離心取上清。

  試劑平衡?

  所有試劑及樣本需室溫平衡30分鐘(18-25℃),避免37℃直接溶解。

  標準品稀釋?

  復(fù)溶標準品后,用稀釋液梯度稀釋至5,000pg/mL→78pg/mL(7個濃度點),0pg/mL為空白對照。

  三、實驗步驟(雙抗體夾心法)?

  加樣?

  每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。

  洗滌?

  棄液后,用洗滌液(PBST)洗板5次,拍干。

  加檢測抗體?

  每孔加100μL生物素化抗體(1:100稀釋),37℃孵育60分鐘。

  加酶結(jié)合物?

  加入HRP標記鏈霉親和素(1:100稀釋),37℃避光孵育30分鐘。

  顯色?

  加TMB顯色液100μL/孔,避光反應(yīng)15-20分鐘(顯藍色)。

  終止與讀數(shù)?

  加50μL終止液(黃色),450nm波長測OD值(需在10分鐘內(nèi)完成)。

  四、數(shù)據(jù)分析?

  標準曲線繪制?

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,擬合四參數(shù)邏輯曲線(R2>0.99)。

  樣本濃度計算?

  根據(jù)樣本OD值從曲線反推濃度,超出范圍需稀釋后重測。

  五、注意事項?

  精密度控制?

  批內(nèi)CV<10%,批間CV<12%。

  干擾因素?

  避免細菌污染(內(nèi)源性HRP導(dǎo)致假陽性)、反復(fù)凍融或劇烈震蕩。

  保存條件?

  未使用的微孔板條需密封防潮,2-8℃保存。

  六、技術(shù)參數(shù)?

  檢測范圍?:15.6-1000pg/mL(靈敏度9.375pg/mL)。

  適用樣本?:血清、血漿、細胞上清、組織勻漿。

  天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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