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大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGATGAB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

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  大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)主要包括試劑準(zhǔn)備、樣本收集與處理、實(shí)驗(yàn)操作及結(jié)果計(jì)算等部分?。以下是詳細(xì)說(shuō)明:

  ?一、試劑準(zhǔn)備?

  試劑盒組件:通常包括酶標(biāo)包被板、標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、酶標(biāo)試劑、樣品稀釋液、顯色劑A液和B液、終止液、封板膜、洗滌液等?。

  試劑保存與平衡:試劑盒應(yīng)保存在2-8℃或-20℃(長(zhǎng)期不用時(shí))。使用前,將試劑盒從冰箱中取出,在室溫下放置20-30分鐘,使試劑盒與室溫平衡?。

  ?二、樣本收集與處理?

  樣本類(lèi)型:包括血清、血漿、尿液、腦脊液、細(xì)胞固體組織等?2。

  血清與血漿處理:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液,離心分離血清和紅細(xì)胞。血漿可使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心去除顆粒?。

  樣本保存:若樣本不立即使用,應(yīng)分成小部分在-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。避免使用溶血或高血脂血樣本?。

  ?三、實(shí)驗(yàn)操作?

  加樣:在待測(cè)樣品孔中加入待測(cè)樣品,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔。同時(shí)設(shè)立陰性對(duì)照孔和空白對(duì)照孔?。

  酶標(biāo)板包被:將酶標(biāo)板置于4℃,包被過(guò)夜?。

  洗板:使用洗滌液洗滌板孔,重復(fù)洗滌3-4次?。

  加酶標(biāo)試劑與顯色:加入酶標(biāo)試劑,然后加入顯色劑A液和B液,進(jìn)行顯色反應(yīng)?。

  終止與測(cè)定:加入終止液終止反應(yīng),使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)?。

  ?四、結(jié)果計(jì)算?

  繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)?。

  樣品濃度計(jì)算:根據(jù)樣品的OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度?;蛘呤褂脴?biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式計(jì)算樣品濃度?1。

  請(qǐng)注意,實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,避免污染和誤差。不同品牌和批次的試劑盒可能略有差異,請(qǐng)仔細(xì)閱讀具體試劑盒的說(shuō)明書(shū)。


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