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牛病毒腹瀉抗體檢測卡用法與判定

閱讀:1697        發(fā)布時間:2022/6/26
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  牛病毒腹瀉抗體檢測卡由預(yù)包被牛病毒性腹瀉抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測牛血清、血漿樣本中牛病毒性腹瀉抗體。實(shí)驗(yàn)時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有病毒性腹瀉抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有牛病毒性腹瀉抗體。
  牛病毒腹瀉抗體檢測卡用法與判定:
  1.1樣本處理
  1.1.1 血清:在室溫下血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
  1.1.2 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,再離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
  1.2 操作步驟 將密封的檢測卡從鋁箔袋中取出,置于干燥平整的桌面上,用吸管吸取適量血清或血漿,緩慢滴加1滴到加樣孔中(約40μL),再滴入2~3滴樣本處理液(約80μL~120μL),并開始計時。加樣完成后10~15分鐘觀察結(jié)果。

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