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使用高分辨質(zhì)譜對(duì)ADC 與mAb進(jìn)行變性及非變性條件下分子量測(cè)定

閱讀:306          發(fā)布時(shí)間:2019-4-24
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隨著生物制藥工業(yè)的發(fā)展,通過(guò)將單克隆抗體本身的二硫 鍵打開(kāi),由此在半胱氨酸的自由巰基上偶聯(lián)小分子藥物 的 ADC 越來(lái)越多。由于此類 ADC 分子鏈間的二硫鍵被打 開(kāi),其輕/重鏈之間僅靠非共價(jià)鍵結(jié)合,在傳統(tǒng)的變性質(zhì) 譜條件下會(huì)解離成抗體片段,無(wú)法測(cè)定完整蛋白的分子量。 非變性質(zhì)譜(Native MS)是一種近年來(lái)得到不斷發(fā)展和 推廣的新興分析技術(shù),可以在保持蛋白非共價(jià)作用力條件 下進(jìn)行分子量測(cè)定,采用非變性質(zhì)譜進(jìn)行 cysteine-linked ADC 分析顯示了強(qiáng)大的應(yīng)用潛力。 

 

Thermo ScientificTM Q ExactiveTM Plus Biopharma 平臺(tái)質(zhì) 譜儀保持了 Orbitrap 超高分辨質(zhì)譜平臺(tái)的固有優(yōu)點(diǎn),如高 分辨率、高質(zhì)量精度和高靈敏度兼具,在此基礎(chǔ)上又對(duì)其 mass range 做了進(jìn)一步擴(kuò)展,新增的 High Mass Range Mode(HMR Mode) m/z 上限可至 8000 Da,同時(shí)又針 對(duì)高質(zhì)量端離子傳輸進(jìn)行了優(yōu)化,進(jìn)一步提高了高質(zhì)量端 離子的傳輸效率,并改進(jìn)了 HCD 的壓力調(diào)節(jié)。該平臺(tái)包 括三種不同分析模式(Standard Mode、Protein Mode 及 HMR mode),可覆蓋生物制藥領(lǐng)域的表征全流程

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