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技術(shù)文章

LC/MS/MS液質(zhì)聯(lián)用儀法定量分析全氟辛酸

閱讀:1486          發(fā)布時(shí)間:2023-5-4

 摘要建立了用Agilent 6410三重串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀分析全氟辛酸(PFOA)的方法。在一根快速分離高通量C18柱(粒徑1.8 µm)上,用含有10 mM醋酸銨的水和甲醇為流動(dòng)相,進(jìn)行簡(jiǎn)單的等度洗脫,PFOA的保留時(shí)間僅為2.3分鐘。在從9 fg/µL到150 pg/µL 4個(gè)數(shù)量級(jí)的范圍內(nèi)呈良好的線性,9 fg/µL濃度水平上的峰面積重現(xiàn)性好,RSD為5.5 %,該濃度下的平均信噪比(S/N)為7.2。相當(dāng)于檢測(cè)地表水提取物所需要的靈敏度。


引言全氟辛酸(PFOA)是合成的化學(xué)物質(zhì),不是天然存在的。各公司使用PFOA制造含氟聚合物,這些聚合物是應(yīng)用價(jià)值的物質(zhì),具有阻燃、抗油、防污、防油脂等特點(diǎn)。毒理學(xué)研究表明,接觸PFOA可引發(fā)生殖/發(fā)育毒性、肝損傷,并可能致癌。PFOA在環(huán)境中長(zhǎng)期存在,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在環(huán)境和普通美國(guó)人群的血液中都有低水平含量的PFOA。EPA近期研究表明,需要加強(qiáng)測(cè)試和監(jiān)測(cè)PFOA的量。歐盟要求飲用水中PFOA < 100 ppt。在本研究中,測(cè)定了濃度范圍從9 fg/µL到150 pg/µL的PFOA標(biāo)準(zhǔn)溶液,校正曲線的線性相關(guān)系數(shù)為R2 >0.997。到1,500 pg/µL濃度水平時(shí)不再呈線性。9 fg/µL濃度連續(xù)進(jìn)樣6次測(cè)定重復(fù)性。最濃度下根據(jù)所測(cè)的峰面積計(jì)算得到的RSD為5.5%。進(jìn)樣體積為10 µL,因此這一低濃度的進(jìn)樣量?jī)H為90 fg。PFOA的結(jié)構(gòu)式如下所示:CF3 – (CF2)6 – COOH該分子為羧酸,電噴霧電離(ESI)負(fù)離子模式應(yīng)有較高的靈敏度。


實(shí)驗(yàn)部分樣品制備PFOA母液濃度為1,500 ng/µL。用甲醇稀釋成0.009、0.015、0.15、0.45、0.75、1.5、15.0、150和1,500 pg/µL一系列濃度。LC/MS 方法結(jié)果與討論圖1是校正曲線。測(cè)定濃度(9 fg/µL)重復(fù)進(jìn)樣9次。15 fg/µL濃度也重復(fù)進(jìn)樣9次。如圖2所示,濃度為9 fg/µL時(shí),峰面積重復(fù)性為5.5% RSD。定義1到1.5分鐘內(nèi)為噪音,該濃度下的信噪比為7.2。LC條件Agilent 1100 系列二元泵、脫氣機(jī)、多孔板進(jìn)樣器和柱溫箱。色譜柱: Agilent ZORBAX Eclipse Plus RRHT C18,2.1 mm × 100 mm, 1.8 µm (部件號(hào) 959764-902)柱溫: 40 °C流動(dòng)相: A = 10 mM 醋酸銨水溶液,B = 10 mM 醋酸銨溶于80:20甲醇/水流速: 0.3 mL/min進(jìn)樣量: 10 µL等度: 85% B停止時(shí)間: 3 分鐘針頭清洗: 75:25 甲醇/水;沖洗10 秒MS條件離子化模式: Agilent G1948B離子源,ESI負(fù)離子模式霧化器: 35 psig干燥氣流速: 10 L/min干燥氣溫度: 300 °CVcap: 4,000 V分辨率 (FWHM): Q1 = 0.7 amu; Q2 = 0.7 amuMRM transition: m/z 413.0 > 369.0碰撞誘導(dǎo)解離電壓: 67 V碰撞能量: 3 V駐留時(shí)間: 200 msec


將1,500 pg/µL濃度添加到校正曲線中,就會(huì)看到圖3中的結(jié)果,需要對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行2次曲線擬合。但可以看出,其相關(guān)系數(shù)良好R2 > 0.99999。


結(jié)論全氟辛酸化合物對(duì)負(fù)離子電噴霧電離模式非常敏感。標(biāo)準(zhǔn)液在9 fg/uL到150 pg/µL范圍內(nèi)顯示了非常好的線性,相當(dāng)于柱上進(jìn)樣量在90 fg到1.5 ng之間。在9 fg/µL測(cè)定的低濃度下峰面積的重復(fù)性為5.5%RSD,這個(gè)濃度下連續(xù)進(jìn)樣的平均信噪比為7.2??梢钥闯?,500 pg/µL,或柱上15 ng時(shí)出現(xiàn)信號(hào)飽和。由于飲用水是比較干凈的基質(zhì),預(yù)計(jì)測(cè)定實(shí)際樣品時(shí)也能達(dá)到類似的靈敏度

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